1、實驗Xi吲哚試驗甲基紅試驗伏安試驗，1。實驗目的和要求。了解IMViC的原理和方法。2.掌握IMVIC在腸道菌群鑒定中的作用；2.基本原則；1.甲基紅試驗。一些細菌(如大腸桿菌、志賀氏菌、需氧菌等。)分解葡萄糖產(chǎn)生多種有機酸，導致培養(yǎng)基的酸堿度降低。在培養(yǎng)的后期，產(chǎn)氣腸桿菌可降解為非酸性終產(chǎn)物，如丙酮酸、乙醇等。通過使用有機酸，導致培養(yǎng)基的酸堿度上升。中性甲基紅：酸性紅：黃色，2。吲哚試驗有些細菌含有色氨酸酶，它能分解蛋白胨中的色氨酸產(chǎn)生吲哚。當吲哚與對二甲氨基苯甲醛結(jié)合時，會形成紅玫瑰吲哚。大腸桿菌吲哚反應陽性，產(chǎn)氣腸桿菌陰性。3。乙酰甲基甲醇試驗(V-P試驗)在葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，一些

2、細菌能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸縮合脫羧成乙酰甲基甲醇，在強堿環(huán)境中，空氣中的氧氣將乙酰甲醇氧化成雙乙酰，雙乙酰與蛋白胨中的胍反應產(chǎn)生紅色化合物，稱為V.P .(反應)。材料和儀器。活體材料：大腸桿菌，產(chǎn)氣腸桿菌，土壤分離物2。葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基，蛋白胨水培養(yǎng)基3。試劑甲基紅試劑、吲哚試劑和v.p .試劑。4.設(shè)備接種環(huán)、酒精燈、恒溫培養(yǎng)箱；4.實驗內(nèi)容和方法；1.試管標記：一個含有微生物、吲哚和釩磷培養(yǎng)液的試管，標有要接種的菌株。2.接種：通過無菌操作將少量菌苔接種到上述相應的試管中。3.培養(yǎng)：在37個恒溫箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)48小時后觀察結(jié)果。5。實驗結(jié)果，m.r .在m.r .培養(yǎng)基中觀察

3、實驗結(jié)果，沿管壁加入23滴甲基紅指示劑，仔細觀察培養(yǎng)基的上層。如果上層培養(yǎng)基變紅，這是一個積極的反應；如果它仍然是黃色的，則是一種負面反應，分別用 或 表示。吲哚試驗結(jié)果觀察取一個吲哚試管，加入40滴乙醚，搖晃幾次，靜置5-10分鐘。乙醚上升后，沿管壁緩慢加入5滴吲哚試劑和等量的釩磷試劑，搖勻，使空氣中的氧氣溶解，乙醚與培養(yǎng)物之間產(chǎn)生一個紅色的環(huán)，作為陽性反應，記錄為吲哚試驗的陽性結(jié)果(用“+”表示)；如果沒有紅環(huán)，將記錄吲哚試驗的陰性結(jié)果(用“+”表示)。靜脈壓試驗結(jié)果觀察取靜脈壓試管，加入等量(20滴)靜脈壓試劑(40%氫氧化鉀和5%萘酚)，搖勻使空氣中的氧溶解，并在37培養(yǎng)箱中保持30分鐘。如果培養(yǎng)液為紅色，記錄v.p .試驗的