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實驗五 網(wǎng)織紅細胞計數(shù),一、試管法,【目的】 掌握網(wǎng)織紅細胞試管法的原理及操作方法。 【原理】 網(wǎng)織紅細胞胞質(zhì)內(nèi)殘存少量核蛋白體和核糖核酸(RNA)等嗜堿性物質(zhì),經(jīng)煌焦油藍或新亞甲藍等染液活體染色后呈藍色網(wǎng)織狀或點粒狀,可與完全成熟的紅細胞區(qū)別。,【操作】 1加染液 2加血染色 3制備涂片 4觀察 5計數(shù) 6計算 7報告方式,【注意事項】 1染液質(zhì)量直接影響網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的準確性。煌焦油藍染液長期普遍應(yīng)用,但溶解度低,易形成沉渣吸附于紅細胞表面;新亞甲藍對Ret染色力強且穩(wěn)定,是WHO推薦使用的染液。試劑應(yīng)定期配制,以免變質(zhì)沉淀。瑞氏染液復染可使網(wǎng)織紅細胞數(shù)值偏低。 2染色時間不能過短,室溫低時,可放置37 溫箱或適當延長染色時間。染液與血液的比例以11為宜。,3因網(wǎng)織紅細胞在體外仍繼續(xù)成熟,其數(shù)量隨著保存時間的延長而遞減,所以標本采集后應(yīng)及時處理;標本染色后也應(yīng)及時測定,因染料吸附可人為增高網(wǎng)織紅細胞計數(shù)值。 4選擇紅細胞分布均勻、網(wǎng)織紅細胞著色好的部位計數(shù)。由于網(wǎng)織紅細胞體積較大,故應(yīng)兼顧血片邊緣和尾部。,二、玻片法,【目的】 掌握網(wǎng)織紅細胞玻片法的原理及操作方法。 【原理】 網(wǎng)織紅細胞胞質(zhì)內(nèi)殘存少量核蛋白體和核糖核酸(RNA)等嗜堿性物質(zhì),經(jīng)煌焦油藍或新亞甲藍等染液活體染色后呈藍色網(wǎng)織狀或點粒狀,可與完全成熟的紅細胞區(qū)別。,【操作】 1加染液 2加血液 3制備涂片
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