1、臨床檢驗標本采集,同濟醫(yī)院檢驗科 程黎明,1.檢查患者 2.申請化驗 3.患者準備 4.標本采集 5.標本運送,臨床檢驗分析前質量控制,臨床檢驗標本采集,血液標本的采集 尿液標本的采集 糞便標本的采集 腦脊液標本的采集 漿膜腔積液標本的采集 細菌學檢驗標本采集,血液樣本的采集,1.影響臨床檢驗結果準確性的因素,生物因素： 固定的生物因素：性別、年齡、種族、遺傳、妊娠 可變的生物因素：營養(yǎng)、飲食、飲酒、體重、肌肉重量、體力活動、 姿勢、氣候、采血時間、作息規(guī)律、治療藥物 干擾因素： 溶血、脂血、膽紅素 抗凝劑、治療藥物及其代謝產物、輸注液 抗凝劑、細菌、真菌,標準餐后：TG50%；AST20%；

2、膽紅素、P、GLU15%；ALT10%； 尿酸、總蛋白、白蛋白、尿素、鈣、鈉、膽固醇5% 飲食結構的不同, 對上述指標影響不同： 高脂肪飲食會使甘油三酯大幅度升高； 高蛋白飲食會使氨、尿酸和尿素值升高較多。 飲酒后：TG、乳酸、UA、乙酸、醛固酮、腎上腺素 ：Glu、LDL-C 飲咖啡(因)后： ：Glu、脂肪酸、血管緊張素、兒茶酚胺,1.影響臨床檢驗結果準確性的因素,生物因素： 固定的生物因素：性別、年齡、種族、遺傳、妊娠 可變的生物因素：營養(yǎng)、飲食、飲酒、體重、肌肉重量、體力活動、 姿勢、氣候、采血時間、作息規(guī)律、治療藥物 干擾因素： 溶血、脂血、膽紅素 抗凝劑、治療藥物及其代謝產物、輸注

3、液 抗凝劑、細菌、真菌,劇烈運動后： k、Ca、Na、 P、 Glu、UREA、UA、BiL、 ALP、 AST、ALT、CK、乳酸等,1.影響臨床檢驗結果準確性的因素,生物因素： 固定的生物因素：性別、年齡、種族、遺傳、妊娠 可變的生物因素：營養(yǎng)、飲食、飲酒、體重、肌肉重量、體力活動、 姿勢、氣候、采血時間、作息規(guī)律、治療藥物 干擾因素： 溶血、脂血、膽紅素 抗凝劑、治療藥物及其代謝產物、輸注液 抗凝劑、細菌、真菌,應用青霉素對常見試驗結果的影響 ：AST、CK、Cr、蛋白電泳、K(靜脈注射青霉素鉀鹽)、血漿蛋白、尿蛋白、BUN、UA、尿17-KS ：血漿白蛋白、膽紅素(新生兒)、HCT、H

4、b、RBC、PLT、K(靜脈注射青霉素鈉鹽)、WBC 應用VitC對常見試驗的干擾 ：皮質激素、Crea、UA、17-OH、17-KS、AST、膽紅素 ：CHO、Glu、LDH、TG、 大便隱血試驗陰性、PT縮短,1.影響臨床檢驗結果準確性的因素,生物因素： 固定的生物因素：性別、年齡、種族、遺傳、妊娠 可變的生物因素：營養(yǎng)、飲食、飲酒、體重、肌肉重量、體力活動、 姿勢、氣候、采血時間、作息規(guī)律、治療藥物 干擾因素： 溶血、脂血、膽紅素 抗凝劑、治療藥物及其代謝產物、輸注液 抗凝劑、細菌、真菌,2.如何控制分析前的影響因素,（1）采血前的準備 采血前禁食12小時，采血前應不喝茶、咖啡和酒，不吸

5、煙 避免劇烈運動 一貫的體位 在不服藥期間采血 在每一天的同一時間采血,理想的采血時間是在早晨7至8點，最后一次食物和液體的攝入應在前一天下午6至7時；在早晨服藥前采血；采集血樣時患者應采取仰臥位。,（2）血液樣本的采集 使用真空采血管 采血管的選擇 采血帶的使用 采血帶使用時間在1分鐘之內，大部分檢驗指標不受影響 回血后應立即松開止血帶 避免反復握拳 采血的順序,讓真空管充血致管內真空耗盡，血流自動停止,CLSI 國際標準真空采血管 充盈的標準,血流自動停止后，把真空管從持針器拔掉,先把真空管從持針器拔掉，然后拔采血針,馬上把含添加劑的真空管搖勻5至10次,持針器,（2）血液樣本的采集 使用

6、真空采血管 采血管的選擇 止血帶的使用 止血帶使用時間在1分鐘之內，大部分檢驗指標不受影響 回血后應立即松開止血帶 避免反復握拳 采血的順序,CLSI真空採血順序,細菌培養(yǎng) 紅 藍 黃 綠 紫 灰 黑,生化免疫指標 凝血指標 生化免疫指標 生化免疫指標 血常規(guī) 血糖 血沉指標,采血量 血液比例過高 由于抗凝劑相對不足，血漿中出現微凝血塊而阻塞儀器的采樣針。 血液比例過低 抗凝劑相對過剩 易溶血 樣本量不足 凝血功能檢查 血常規(guī)檢查,凝血功能檢查務必要求采血量準確,采用枸櫞酸三鈉抗凝 抗凝劑:血=1:9 采血量不足，PT、APTT明顯延長,采血量 血液比例過高 由于抗凝劑相對不足，血漿中出現微凝

7、血塊而阻塞儀器的采樣針。 血液比例過低 抗凝劑相對過剩 易溶血 樣本量不足 凝血功能檢查 血常規(guī)檢查,血常規(guī)檢查,采用EDTAK2抗凝 EDTA在血中濃度達到2.5mg/ml時，中性粒細胞會腫脹，分葉消失，血小板會腫脹，崩解，影響血常規(guī)結果。 采血量1.5-2mL,采血部位 避免在輸液過程中采血！ 嚴禁在靜脈輸液側采血! 避免從留置血導管采血！ 靜脈血生化、血常規(guī)、免疫等。 動脈血血氣分析時,充分混勻，避免血凝！ 避免溶血！,造成溶血的因素,用力推血 采血不順利 混勻過猛 運輸 采血量不足 酒精未干 漏氣 試管質量,推薦使用真空采血系統(tǒng)！,3.血液樣本的運送,標本運送要注意防止標本外溢、蒸發(fā)和

8、污染(標本管要蓋蓋子),應嚴密包裝;有特殊要求的標本要按特殊要求運送(如血氣分析標本應嚴格密封,與外界空氣隔絕;測定維生素A、維生素B6 、2胡蘿卜素、膽紅素等標本,應注意避免暴露于光線下,用黑紙或鋁箔保護標本)。 血樣應豎直放置 避免晃動血樣, 產生溶血,快！,立即送檢：血氨、血沉、血氣、酸性磷酸酶、乳酸、各種培養(yǎng) 0.5h內：血糖、電解質、血液細胞學、體液細胞學、涂片找細菌、真菌 12h內：各種蛋白質類、色素類、激素類、脂類、酶類、抗原、抗體、尿液 超過2h，分離血清或血漿保存,特殊樣本血氣分析,1.標本要求 全血,以動脈血或動脈化毛細血管血為主 只有動脈血才能真實反映體內代謝氧化作用和酸

9、堿平衡的狀況 動脈血液的氣體含量幾乎無部位差異，從主動脈到末梢循環(huán)都是均一的 對O2檢測的有關指標必須采集動脈血，才能真正反映體內氧的運輸狀態(tài) 對PCO2和pH的檢測也以采集動脈血為好。血液循環(huán)無障礙的病人，靜脈血的這兩項指標基本也可反映體液酸堿狀況,特殊樣本血氣分析,動脈血： 部位：肱動脈、股動脈、前臂動脈以及其他任何部位的動脈均可 采血：專用的血氣分析針采集 動脈化毛細血管血：指局部組織末梢經45溫水熱敷，使循環(huán)加速，血管擴張，局部毛細血管血液中PO2和PCO2值與毛細血管動脈端血液中的數值相近，此過程稱為毛細血管動脈化 靜脈血：靜脈血所測結果不適用于了解體內O2的運輸狀態(tài)，故PO2及有關

10、推算數據僅供參考，對pH及PCO2等酸堿平衡指標是適用的。采靜脈血盡可能不使用止血帶,特殊樣本血氣分析,3.標本采集的注意事項 臥床5分鐘 治療過程中采血要特別注意病人所處的狀態(tài) 肝素抗凝，凍干肝素優(yōu)于液體肝素 注意防止血標本與空氣接觸 標本放置時間：按要求，采取的血標本應在30分鐘內檢測完畢，如30分鐘后不能檢測，應將標本置于冰水中保存，最多不超過2小時，在30分鐘到2小時之間，血PO2值是個懷疑值，僅供參考,尿液標本的采集,晨尿或隨機尿 清潔、專用容器， 避免經血、白帶、精液、糞便等污染 2h內送檢 24h尿 中段尿,24h尿留取方法,清晨8時排尿棄去；8時后的尿液全部收集于一個大的容器內

11、（由檢驗科提供，預先加入防腐劑），至第二日晨8時，將最后一次尿液排入容器中。將全部標本混合均勻后，用量桶量取總量并記于化驗單之上，再從混合均勻的尿液中取出適量的尿標本送檢。,晨尿或隨機尿 清潔、專用容器， 避免經血、白帶、精液、糞便等污染 2h內送檢 24h尿 中段尿,中段尿留取方法,-四塊肥皂飽和的紗布、四塊干紗布、手套、無菌容器 -戴上手套、兩腿分開站在抽水馬桶前，用一只手分開陰唇 -用肥皂飽和的紗布從前到后擦洗生殖器區(qū)域4次 -用干紗布從前到后擦4次 -排尿入抽水馬桶 -將盛尿容器置于尿流中 -將殘尿排入抽水馬桶 晚上盡量憋尿，留取晨尿 2小時內處理，若不能及時運送，保存于4不超過6小時

12、。,糞便標本的采集和送檢,潔凈、有蓋、專用容器 不得混有尿液，不可有消毒劑及污水 不得用衛(wèi)生紙包裹 留取10g以上（拇指大?。┘S便 重點留取黏液、膿血等腸脫落組織及可疑部位 外觀無異常的糞便可在表面及內部不同部位取材 及時送檢 查阿米巴滋養(yǎng)體應保溫、快送,腦脊液標本采集,一般分3瓶收集 第一瓶作細菌培養(yǎng) 第二瓶作化學分析和免疫學檢查 第三瓶作一般性狀及顯微鏡檢查（腦脊液常規(guī)） 每瓶收集12ml 立即送檢！,漿膜腔積液標本采集,漿膜腔積液包括胸水、腹水、心包液、關節(jié)液及鞘膜液等。 胸水及腹水抽取10 mL，心包液、關節(jié)液等抽取25 mL。 一般檢查分裝于兩試管中，一管加抗凝劑，另一管不加抗凝劑。

13、 立即送檢或置4冰箱保存。 抗凝劑為100g/L的乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）或肝素鈉,其他,十二指腸液 胃液 精液 前列腺液 白帶 陰道/宮頸脫落細胞,細菌學檢驗標本采集及注意事項,總原則,無菌操作，有蓋無菌容器，盡量不用棉拭子(咽喉及生殖道除外) 應把握采樣時機，選擇采樣部位 應在使用抗生素前采集標本，如已經用藥，需停藥三天采集標本；如不能停藥者，應在下次用藥前采集 盡快送檢，如不能及時送檢應予冷藏保存(腦脊液、血培養(yǎng)瓶除外) 標本中不可添加防腐劑,血液及骨髓,血培養(yǎng)檢測指征: 發(fā)熱（38）或低體溫（36）；寒戰(zhàn)； 白細胞增多，特別有“核左移”時 粒細胞減少 血小板減少；皮膚黏膜出血

14、；昏迷和多器官衰竭等,血液及骨髓,1.采血時間 抗生素使用前采集；若已用藥，應在下次用藥前采集 細菌進入血流約1小時出現寒戰(zhàn)、高熱，盡可能在寒戰(zhàn)、高熱前，或寒戰(zhàn)、高熱時立即采集。發(fā)熱被抑制后，隨時間延遲，檢出率下降 若熱型穩(wěn)定，最好在發(fā)燒前采集 皮膚消毒，防止污染（毛囊內含有細菌，須待消毒劑發(fā)揮作用使細菌崩解后抽血，皮膚上有很多SCN） 含碘制劑需要足夠消毒時間（碘酊、洗必泰30s，碘伏1.52m） 血培養(yǎng)瓶：瓶蓋0.5%碘伏消毒30s1 min 標本采集：無菌操作，靜脈采集，盡可能不經留置導管采集，避免污染；輕顛倒混勻防凝固；污染率應小于3%,血培養(yǎng)前10位病原菌,血液及骨髓,2.樣本量：

15、血培養(yǎng) 常規(guī)血培養(yǎng)包括需氧/厭氧各1瓶（1套） 成人每次20ml 30ml；兒童-ml；嬰兒及新生兒盡量采集。每次采血均分至兩瓶（成人每瓶10ml；兒童每瓶1-3ml）。血量不足-先需氧瓶，剩余血接種厭氧瓶。 （減少1ml，陽性率降低35%） 建議每次采二套，最好三套（不同時間，不同部位）。 骨髓培養(yǎng)：盡量采集(2ml) 貼條碼和標簽：標簽不可遮蓋條碼 立即送檢 保存：備用瓶應置室溫，絕不可放冰箱；,血液及骨髓,輸液反應 血培養(yǎng) 剩余液體 剩余液體很容易污染（經很多途徑），有時濃度不高不足以致病。 若只培養(yǎng)液體，很難說明是輸液的原因。 若血培養(yǎng)無，則不能說明是液體的原因。,血液及骨髓,血培養(yǎng)瓶（BD）的選擇： 灰色瓶蓋-成人中和抗生素需氧瓶(10ml) 粉紅色瓶蓋-兒童中和抗生素需氧瓶(1-3ml) 金黃色瓶蓋-中和抗生素厭氧瓶(10ml),血液及骨髓,血培養(yǎng)瓶（BacT/Alert）的選擇 黃色瓶蓋-兒童中和抗生素需氧瓶(1-3ml) 淺綠色瓶蓋-成人中和抗生素需氧瓶(10ml) 金黃色瓶蓋-中和抗生素厭氧瓶(10ml) 紅色瓶蓋分支桿菌培養(yǎng)瓶（10ml）,呼吸道標本,上呼吸道標本 清水漱口 將咽拭子越過舌根到咽后壁或懸雍垂的后側，或扁桃體上涂抹明顯發(fā)紅或偽膜存在的部位 避免觸及舌，口腔粘膜和唾液 下呼吸道標本 晨痰：用清水反復嗽口后用力自氣管深部