1、檸檬酸含量的測(cè)定方法（實(shí)訓(xùn)指導(dǎo)）以飲料中檸檬酸含量的測(cè)定為實(shí)訓(xùn)案例，介紹酸堿滴定法和褪色光度法測(cè)定 檸檬酸含量的方法1酸堿滴定法1.1測(cè)定原理用酚猷做指示劑，用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液同時(shí)直接滴定第一步、第二步和第三 步離解產(chǎn)生的H+,根據(jù)終點(diǎn)時(shí)消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，可以求出檸檬酸 的含量。1.2儀器設(shè)備三角瓶150mL、堿式滴定管1.3試劑lmol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液10g/L酚猷指示劑1.4操作步驟稱取試樣1.5g （稱準(zhǔn)至0.0002g）于150mL的三角瓶中，力口 40mL新煮沸的 冷蒸餛水溶解。加3滴1%酚猷指示劑，用lmol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微 紅色為終點(diǎn)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。1

2、.5結(jié)果計(jì)算結(jié)果記錄見下表表5-1飲料中檸檬酸含量的測(cè)定J JJJ 測(cè)定次數(shù)測(cè)定內(nèi)容123待測(cè)樣品質(zhì)量（m） , g滴定樣品時(shí)所耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（VD , mL空白滴定時(shí)所耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（Vo） , mL樣品中一水檸檬酸含量（W1 ）, %樣品中一水檸檬酸平均含量（W1 ）, %樣品中無水檸檬酸含量（W2）, %樣品中無水檸檬酸平均含量（W2）, %檸檬酸含量計(jì)算公式如下:錯(cuò)誤!未找到引用源。W1 一水檸檬酸含量（按無水計(jì)），%;W2一無水檸檬酸含量，%；Vi滴定試樣所消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL； Vo空白滴定所消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL； C氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃

3、度，mol / L； m一試樣質(zhì)量，g；0.06404 與1.00mL氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液CNaOH=1.000mol/L相當(dāng)?shù)?以克表示的檸檬酸的質(zhì)量；0.08566水檸檬酸（C6H8H2O）中的壓0的理論含量，即錯(cuò)誤!未找到引用源。.2褪色光度法1測(cè)定原理在HAc-NH4Ac介質(zhì)中，鐵（III）-磺基水楊酸生成紫紅色配合物，再向該溶 液中加入一定量的檸檬酸溶液，該配合物顏色退至橙紅色。在470nm波長(zhǎng)處， 其吸光度的減少與檸檬酸的含量在一定條件下成正比，從而可求得檸檬酸的含 量。2儀器設(shè)備紫外-可見分光光度計(jì)、酸度計(jì)3試劑10g/L的檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：稱取5g檸檬酸，溶解在蒸餡水中，定容

4、至 250mLolg/L的檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:吸取10g/L的檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液lO.OmL, 加水定容至lOOmLo0.01mol/L 的鐵(III)溶液：稱取 4.8220gNH4Fe(SO4)2 - 12H2O,用 0.025mol/LHCI04 溶解，加水定容至 lOOOmL。0.01mol/L的磺基水楊酸溶液：稱取磺基水楊酸5420g,用0.025mol/L 的HCIO4溶解，加水定容至lOOOmLoHAc-NH4Ac緩沖溶液：取冰醋酸28mL,加500mL水稀釋，然后用 濃氨水調(diào)節(jié)溶液PH值至4.5為止。0.025mol/L 的 HCIO4 溶液。4操作步驟磺基水楊酸鐵配合物吸光度的測(cè)

5、定往25mL比色管中依次加入l.OmL鐵(III)溶液，4.0mL磺基水楊酸 溶液，4.0mL HAc-NH4Ac緩沖溶液，加水定容至刻度。lOmin時(shí)，在47()nm 處用1.0cm比色皿以蒸餡水作參比測(cè)得吸光度Ao.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制另取6支25mL比色管，同(1)操作，僅在定容前分別加入0mL、0.2mL、 0.4mL、0.6mL、0.8mL、l.OmL檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，各管溶液中檸檬酸的 含量分別為 O.Omg、0.2mg 0.4mg、0.6mg、0.8mg、l.Omg,分別測(cè)得吸光 度A,計(jì)算 A=Ao-A,以檸檬酸的含量mg/(25mL)為橫坐標(biāo)，為縱坐標(biāo) 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品的測(cè)定精

6、確稱取O.lg樣品，用水溶液并定容至100mL,另取1支25mL比色管， 同(1)操作，僅在定容前加入0.5mL樣品溶液，測(cè)得吸光度Ax,計(jì)算 Ax=Ao-Ax .結(jié)果記錄與計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制記錄如表2：表2：標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制記錄溶液中檸檬酸的含量吸光度A參比吸光度A0A=A（）A0.00.20.40.60.81.0表3：檸檬酸含量的測(cè)定記錄表按下式計(jì)算樣品中檸檬酸的含量:測(cè)定次數(shù)測(cè)定內(nèi)容JJ_123待測(cè)樣品質(zhì)量(m) , g吸光度Ax參比吸光度AAx=A（）-Ax樣品溶液中檸檬酸含量，mi/mg樣品中檸檬酸的含量(w), %樣品中檸檬酸平均含量，%相對(duì)平均偏差(%)式中：w-樣品中檸檬酸的含量，%