1、1,教 案 編 制,授課內(nèi)容：Rh血型系統(tǒng) 授課學(xué)時(shí)：1學(xué)時(shí) 重點(diǎn)內(nèi)容：Rh血型抗原與抗體及臨床意義； 交叉配血 熟習(xí)內(nèi)容：Rh血型鑒定方法。 了解內(nèi)容：其它紅細(xì)胞血型系統(tǒng),醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站 ,二.Rh血型系統(tǒng),Rh 血型系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn) 1937年-1939年 Landsteiner和Wiener用恒河（rhesus）紅細(xì)胞免疫家兔和豚鼠得到的抗血清將人紅細(xì)胞分為Rh陰性和Rh陽(yáng)性 1939年 Levine和Stetsen在一患死胎的孕婦血清中檢測(cè)到一種抗體，此為人類發(fā)現(xiàn)的第一例Rh抗體 1941-1945年 確定了人體紅細(xì)胞上含有Rh系統(tǒng)的六種抗原，即D、d；E、e；C、c。D和d；E和e；C和c

2、表現(xiàn)為對(duì)偶關(guān)系，但d抗原只是推測(cè)。,Rh血型的定義,根據(jù)紅細(xì)胞上D抗原的有無(wú)可將人類 紅細(xì)胞分為Rh陽(yáng)性和Rh陰性，即紅細(xì)胞 上缺乏D抗原的人是Rh陰性；紅細(xì)胞有D 抗原的人是Rh陽(yáng)性 Rh血型的遺傳學(xué)說(shuō)及命名 Rh-Hr命名法（Wiener學(xué)說(shuō)） CDE命名法（Fisher-Race學(xué)說(shuō)） 數(shù)字命名法,4,.Rh抗原 Rh抗原有40多種， Rh抗原的發(fā)育 Rh抗原是胎兒早期就充分發(fā)育并維持整個(gè)一生，臍帶血或新生兒的紅細(xì)胞Rh血型與成人一樣強(qiáng)。 與臨床關(guān)系最密切：D、E、C、c、e 5種，D的抗原性最強(qiáng)?？乖瓘?qiáng)弱次序?yàn)?DE C ce 我國(guó)Rh頻率約占人群中的0.34%,二.Rh血型系統(tǒng),醫(yī)學(xué)

3、全在線網(wǎng)站 ,Rh血型的 D變異型,D變異型的定義： 有些含D抗原的紅細(xì)胞與某些抗D血清反應(yīng)， 而與另一些抗D血清不反應(yīng)，這些紅細(xì)胞所含的D 抗原可能缺少完整D抗原的某些成份或者呈現(xiàn)很 弱的抗原活性，這些D抗原統(tǒng)稱為D變異型。 D變異型包括弱D型（Du）和不完全D型 （partial D）,D變異型抗原的特點(diǎn) 與一些抗D血清發(fā)生凝集反應(yīng)，而與另一些抗D血清不發(fā)生凝集反應(yīng)，要證實(shí)這種弱表現(xiàn)的D抗原，需用間接抗球蛋白試驗(yàn)。,9,.Rh系統(tǒng)抗體 多是通過外來(lái)RBC免疫刺激后產(chǎn)生，即通過輸血或妊娠免疫而產(chǎn)生。這些抗體均為IgG。一般在初次免疫后26個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)，經(jīng)再次免疫后，3周內(nèi)抗體濃度可達(dá)到高峰。大

4、約1/3的Rh陰性的人，經(jīng)Rh陽(yáng)性抗原免疫后，不產(chǎn)生抗D.非免疫的Rh抗體極為罕見. D抗原是非ABO紅細(xì)胞抗原中免疫性最強(qiáng)的抗原，可以引起抗D的產(chǎn)生，抗D與D紅細(xì)胞產(chǎn)生嚴(yán)重的溶血反應(yīng)。,. Rh血型鑒定,常規(guī)情況下，紅細(xì)胞只做Rh（D）定型， 對(duì)供血者需鑒定D變異型，只有特殊情況下才檢查其它抗原。例如：家系調(diào)查、父權(quán)鑒定、產(chǎn)前檢查、確定純合子或雜合子以及配血試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)有不規(guī)則抗體存在等情況下才需做Rh血型全部表現(xiàn)型的定型,醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站 ,11,1.Rh血型鑒定及方法學(xué)評(píng)價(jià)： Rh抗體屬IgG不能在鹽水介質(zhì)中與RBC發(fā)生凝集。 (1).低離子強(qiáng)度鹽水試驗(yàn) 原理： 降低介質(zhì)的離子強(qiáng)度可減少RB

5、C外圍的離子云 促進(jìn)IgG分子在兩個(gè)RBC之間搭橋使之結(jié)合， 能縮短抗原與抗體的反應(yīng)時(shí)間，并提高其靈敏度。,12,(2).抗人球蛋白法：又稱Coombs試驗(yàn),直接法：可檢查受檢者的RBC是否已被不完全抗體致敏；,間接法：可用于鑒定Rh血型及血清中是否存在不完全抗體。,13,(3).酶介質(zhì)法： 原理： 木瓜酶或菠蘿酶可以破壞RBC表面的唾液酸， 使RBC膜失去電荷，縮小RBC間的距離； 酶可以部分地改變RBC結(jié)構(gòu)，使某些隱蔽的 抗原得以暴露，增強(qiáng)凝集性 (4).聚凝胺法： 本法用于臨床配血是切實(shí)可行的。,2 .Rh血型鑒定可能出現(xiàn)假陽(yáng)性的原因,受檢細(xì)胞直抗陽(yáng)性 高蛋白試劑引起緡錢狀凝集 纖維蛋白

6、造成的凝塊 定型試劑中存在的其它抗體 多凝集細(xì)胞造成的假陽(yáng)性 鑒定器材和試劑血清被污染,醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站 ,3.Rh血型鑒定可能出現(xiàn)假陰性的原因,受檢細(xì)胞懸液濃度太高，與試劑血清比例失調(diào)。 漏加或錯(cuò)加定型試劑 觀察結(jié)果時(shí)搖動(dòng)用力過度，搖散弱凝集。 試劑血清保存不當(dāng)引起變質(zhì),16,.RH血型的臨床意義： 1.與輸血關(guān)系： Rh第一次接受Rh血液不溶血，產(chǎn)生抗體 Rh第二次接受Rh血液產(chǎn)生大量的抗體，溶血 2.與新生兒溶血病的關(guān)系：孕婦血漿中如有Rh抗體，妊娠Rh血型不配合胎兒時(shí)，其中IgG類的Rh抗體可以通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)。,17,三、其它紅細(xì)胞血型系統(tǒng),MNSsU血型系統(tǒng) 有40個(gè)抗原，基因表

7、達(dá)產(chǎn)物為MN唾液酸糖蛋白、Ss唾液酸糖蛋白 P血型系統(tǒng) Kell血型系統(tǒng) Kidd血型系統(tǒng) Lewis血型系統(tǒng),18,【原理 （principle） 】(鹽水法),（五）.交叉配血,19,【報(bào)告方式】 1.如兩管均無(wú)凝集，則報(bào)告： 病人XX（X型）血清獻(xiàn)血者XX（X型）紅細(xì)胞 有或無(wú)凝集溶血 病人XX（X型）紅細(xì)胞獻(xiàn)血者XX（X型）血清 有或無(wú)凝集溶血 （XX配血法） 2. 任何一管或兩管有凝集或溶血: 立即復(fù)查血型或查明其他原因如實(shí)報(bào)告，并與病室 聯(lián)系，決不能隨便輸血。,20,鹽水法評(píng)價(jià),安全輸血包括檢測(cè)ABO相合與否，也包括免疫性抗體的檢測(cè)。最初的交叉配血以鹽水介質(zhì)為主，而鹽水介質(zhì)實(shí)驗(yàn)只能

8、發(fā)現(xiàn)ABO不配合，不能檢出IgG抗體，所以血庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)不要求鹽水介質(zhì)實(shí)驗(yàn)的配血，而要求在血清學(xué)配合實(shí)驗(yàn)中使用能展示ABO不配合和在37有活性的、有臨床意義重要抗體的方法。從安全輸血的角度和今后發(fā)展趨勢(shì)分析，鹽水介質(zhì)法將會(huì)和其他技術(shù)聯(lián)合運(yùn)用。,21,凝聚胺法 【原理】,紅細(xì)胞膜表面的唾液酸帶有的大量的負(fù)電荷，可避免其發(fā)生自發(fā)凝聚，使紅細(xì)胞保持最大的表面面積，增加氧的轉(zhuǎn)移能力和氣體擴(kuò)散。紅細(xì)胞懸浮在電解質(zhì)內(nèi)，陽(yáng)離子被紅細(xì)胞的負(fù)電荷吸引，紅細(xì)胞被擴(kuò)散的雙層離子云圍繞，形成zeta電位，它決定紅細(xì)胞之間的排斥作用。,醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站 ,22,凝聚胺法步驟,Polybrene技術(shù)首先利用低離子介質(zhì)（LIM），介質(zhì)的離子強(qiáng)度是影響抗體結(jié)合紅細(xì)胞原能力的重要理化條件之一，正負(fù)離子相互作用力-即靜電力顯著影響抗體與紅細(xì)胞的反應(yīng)。減低介質(zhì)的離子強(qiáng)度，減少了紅細(xì)胞周圍的陽(yáng)離子云，從而促進(jìn)帶正電荷的lgG與帶負(fù)電荷的紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，以促進(jìn)紅細(xì)胞和血清（血漿）中的抗體結(jié)合。其后，加入凝聚胺（Polybrene）試劑。凝聚胺是一種高價(jià)陽(yáng)離子季胺鹽多聚物，溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可以中和紅細(xì)胞膜表面的唾液酸帶有的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞的zeta電位降低，紅細(xì)胞之間距離減少，使紅細(xì)胞發(fā)生凝聚。最后，加入復(fù)