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1、因?yàn)榧?xì)菌非常小,所以只能在顯微鏡下測(cè)量。用于測(cè)量微生物細(xì)胞大小的工具包括目鏡測(cè)微計(jì)和顯微鏡載物臺(tái)測(cè)微計(jì)。目鏡測(cè)微計(jì)(圖20-1)是一個(gè)圓形載玻片,載玻片的中心被切成50等份,長(zhǎng)度為5毫米,或100等份,長(zhǎng)度為10毫米。測(cè)量時(shí),將其放在目鏡的擋板上(剛好與物鏡放大的中間圖像重疊),以測(cè)量顯微鏡放大的細(xì)胞圖像。由于不同目鏡和物鏡組合的放大率不同,每個(gè)目鏡測(cè)微計(jì)網(wǎng)格的實(shí)際長(zhǎng)度也不同,得到了在一定放大率下每個(gè)目鏡測(cè)微計(jì)網(wǎng)格所代表的相對(duì)長(zhǎng)度。圖20-1,(1)取下目鏡,擰下目鏡上的透鏡,將目鏡測(cè)微計(jì)放在目鏡的中間隔板上,使刻度面朝下,然后擰上透鏡,放入鏡筒。目鏡測(cè)微計(jì)的校準(zhǔn),(2)將物鏡測(cè)微計(jì)放在顯微鏡
2、臺(tái)上,使刻度面朝上,就像觀察樣品一樣,這樣刻度圈就位于視野中??吹轿镧R千分尺的刻度后,轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡,使目鏡千分尺的刻度與物鏡千分尺的刻度平行,并使兩英尺左側(cè)的第一條線重合,然后在右側(cè)尋找另一條兩英尺的重合線。(4)記錄目鏡測(cè)微計(jì)的網(wǎng)格數(shù)和物鏡測(cè)微計(jì)的網(wǎng)格數(shù),用同樣的方法測(cè)量不同放大倍數(shù)物鏡下每個(gè)網(wǎng)格的實(shí)際長(zhǎng)度。目鏡測(cè)微計(jì)的每格長(zhǎng)度=兩個(gè)重疊標(biāo)尺之間物鏡測(cè)微計(jì)的格數(shù)為10 m/兩個(gè)重疊標(biāo)尺之間目鏡測(cè)微計(jì)的格數(shù)。這樣確定的目鏡測(cè)微計(jì)的刻度只適用于測(cè)量用顯微鏡的目鏡和物鏡的放大倍數(shù)。如果更換物鏡,必須再次校準(zhǔn)目鏡的放大率。眾所周知,顯微鏡測(cè)微計(jì)的每個(gè)網(wǎng)格是10微米,因?yàn)轱@微鏡測(cè)微計(jì)和細(xì)胞樣本在同一位置。
3、它必須被物鏡和目鏡放大兩倍才能進(jìn)入視野,也就是說,顯微鏡載物臺(tái)千分尺隨著顯微鏡的放大而放大。因此,顯微鏡載物臺(tái)千分尺的讀數(shù)就是細(xì)胞的真實(shí)大小。因此,顯微鏡載物臺(tái)千分尺的已知長(zhǎng)度被用于在某一放大率下校正目鏡千分尺,并且可以獲得目鏡千分尺的每一幀所代表的長(zhǎng)度。然后,取下顯微鏡載物臺(tái)千分尺,更換待測(cè)樣品,用校正后的目鏡千分尺以相同的放大率測(cè)量微生物。1、目鏡測(cè)微計(jì)的校準(zhǔn)旋松目鏡的上透鏡,將目鏡測(cè)微計(jì)的刻度向下輕輕安裝在目鏡的光闌上,將顯微鏡載物臺(tái)測(cè)微計(jì)放在載物臺(tái)上,使刻度向上。2。用低倍鏡觀察,瞄準(zhǔn)焦距,在視野中清楚地看到顯微鏡載物臺(tái)千分尺的刻度后,轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡,使目鏡千分尺和顯微鏡載物臺(tái)千分尺的刻度平
4、行,移動(dòng)推動(dòng)器,使兩只腳重疊,然后使兩只腳的“0”刻度完全重合。3.定位后,仔細(xì)尋找兩英尺的第二個(gè)完全重疊的刻度(圖20-3),并計(jì)算兩個(gè)重疊的刻度。因?yàn)轱@微鏡載物臺(tái)千分尺的刻度是每幀10米長(zhǎng),所以目鏡千分尺每幀所代表的長(zhǎng)度可以通過以下公式計(jì)算。4。例如,目鏡測(cè)微計(jì)的5個(gè)單元正好與鏡臺(tái)測(cè)微計(jì)的5個(gè)單元重疊。如果已知鏡臺(tái)千分尺的每個(gè)單元為10米,那么目鏡千分尺上每個(gè)單元的長(zhǎng)度為=510米/510米。高倍率鏡和油鏡下目鏡測(cè)微計(jì)的每個(gè)單元所代表的長(zhǎng)度用相同的方法進(jìn)行校正。由于不同的顯微鏡和附件具有不同的放大率,目鏡測(cè)微計(jì)的校準(zhǔn)必須針對(duì)特定的顯微鏡和附件(特定的物鏡、目鏡和鏡筒長(zhǎng)度)進(jìn)行,并且只能在特定情況下重復(fù)使用。更換不同放大率的目鏡或物鏡時(shí),必須重新校準(zhǔn)目鏡千分尺每一幀所代表的長(zhǎng)度。由于體積小,只能在顯微鏡下測(cè)量。用于測(cè)量微生物細(xì)胞大小的工具不同目鏡和物鏡組合的放大倍數(shù)不同,目鏡測(cè)微計(jì)每個(gè)單元的實(shí)際長(zhǎng)度也不同。因此,在測(cè)量微生物尺寸時(shí),目鏡測(cè)微計(jì)必須用放在鏡臺(tái)上的顯微鏡載物臺(tái)測(cè)微計(jì)進(jìn)行校正,以找出在一定放大倍數(shù)下目鏡測(cè)微計(jì)的每個(gè)單元所代表的相對(duì)長(zhǎng)度。顯微鏡載物臺(tái)千分尺(圖20-2)是一個(gè)載玻片,其中心
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