1、分子吸收光譜,分子吸收光譜是物質(zhì)的分子吸收了光能以后所產(chǎn)生的內(nèi)部運(yùn)動的綜合表現(xiàn)。,分子吸收光譜,可見吸收光譜,紫外吸收光譜,紅外吸收光譜,比色法,紫外分光光度法,紅外分光光度法,一、分子吸收光譜的成因, 光是一種電磁波，具有波粒二相性。波動性：可用波長( )、頻率(v )和波數(shù)來描述。,微粒性：可用光量子的能量來描述：, 分子對輻射的吸收 （1） 分子的結(jié)構(gòu) 分子,原子,原子核,外層電子,物質(zhì)分子內(nèi)部三種運(yùn)動形式： （1）電子相對于原子核的運(yùn)動 （2）原子核在其平衡位置附近的相對振動 （3）分子本身繞其重心的轉(zhuǎn)動 分子具有三種不同能級：電子能級、振動能級和轉(zhuǎn)動能級,分子的內(nèi)能：電子能量Ee 振

2、動能量Ev 轉(zhuǎn)動能量Er EEe+Ev+Er 三種能級都是量子化的，即它們以不連續(xù)能級的形式存在 evr,（2）分子吸收輻射有三個(gè)基本過程，每個(gè)過程都包含將分子升高到一個(gè)較高的內(nèi)部能級，而其能量的增加恰等于吸收輻射的能量（h）。,E,轉(zhuǎn)動躍遷,振動躍遷,電子躍遷,純轉(zhuǎn)動躍遷可發(fā)生在遠(yuǎn)紅外和微波區(qū)，此處能量不足以引起振動或電子躍遷，這個(gè)區(qū)域在分析上用途不大。,振動轉(zhuǎn)動躍遷的不同組合，形成尖峰狀波譜，這些波長多發(fā)生在中紅外區(qū)。,不同能級的電子躍遷并被疊加到轉(zhuǎn)動和振動躍遷上，導(dǎo)致數(shù)量更大的躍遷 呈現(xiàn)吸收波長寬闊的帶光譜,二、分子吸收光譜的應(yīng)用 -分光光度法介紹,1、紫外分光光度法 2、可見分光光度法

3、 3、紅外分光光度法,一、紫外分光光度法,內(nèi)容簡介： 1、紫外光譜圖介紹 2、紫外吸收光譜的影響因素 3、紫外分光光度法的應(yīng)用 4、實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng) 5、儀器的校正與檢定,1、紫外光譜圖的組成,紫外光譜圖是由橫坐標(biāo)、縱坐標(biāo)和吸收曲線組成的。 橫坐標(biāo)表示吸收光的波長，用nm（納米）為單位。 縱坐標(biāo)表示吸收光的吸收強(qiáng)度，可以用A(吸光度)、或T(透射比或透光率或透過率) 來表示。 吸收曲線表示化合 物的紫外吸收情況。, 波長范圍 遠(yuǎn)紫外區(qū)：100nm 200nm 近紫外區(qū)：200nm 400nm 紫外吸收光譜: 電子躍遷光譜,吸收光波長范圍 200nm400nm（近紫外光譜）。,2、紫外吸收光譜的

4、影響因素, 影響紫外吸收帶形狀的因素有： 被測化合物的結(jié)構(gòu) 測定的狀態(tài) 測定的溫度 溶劑的極性,（1）紫外吸收曲線的影響因素 影響紫外吸收帶形狀的因素有： 被測化合物的結(jié)構(gòu) 測定的狀態(tài) 測定的溫度 溶劑的極性, 被測化合物的結(jié)構(gòu)影響吸收帶的波長范圍 和吸收強(qiáng)度,根據(jù)躍遷類型的不同，將吸收帶分為四種： R-帶： n* C=O、-N=O、-NO2、-N=N- 吸收強(qiáng)度很弱 隨著溶劑的極性增強(qiáng)， max向 短波長方向移動（藍(lán)移）, 被測化合物的結(jié)構(gòu)影響吸收帶的波長范圍 和吸收強(qiáng)度,K-帶： * C=C-C=C 吸收強(qiáng)度強(qiáng) B-帶： 苯的 * 通常230nm270nm，重心265nm 芳香族化合物的特

5、征吸收, 被測化合物的結(jié)構(gòu)影響吸收帶的波長范圍 和吸收強(qiáng)度,E-帶：苯環(huán)共軛系統(tǒng)的 * E1 184nm E2 204nm, 溶劑極性的影響,極性溶劑使精細(xì)結(jié)構(gòu)消失, 影響紫外吸收強(qiáng)度的因素有： 能差因素： 能差小，躍遷幾率大 空間位置因素：處在相同的空間區(qū)域躍遷幾 率大,3、紫外分光光度法的應(yīng)用,紫外可見分光光度法是通過被測物質(zhì)在紫外光區(qū)的特定波長處或一定波長范圍內(nèi)的吸光度，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。 本法在藥品檢驗(yàn)中主要用于藥品的定性（鑒別）和 定量分析（檢查、含量測定）。,3.1 幾個(gè)基本概念,max：最大吸收波長，單位 nm ：摩爾吸收系數(shù)，單位 Lmolcm A1cm1%：百

6、分吸收系數(shù)，單位 Lgcm,特點(diǎn)說明：, max 同一種物質(zhì)對不同波長光的吸光度不同，吸光度最大處對應(yīng)的波長稱為最大吸收波長max。 不同濃度的同一種物質(zhì)，其吸收曲線形狀相似max不變。 不同濃度的同一種物質(zhì)，在max處吸光度A隨濃度變化的幅度最大，所以測定最靈敏。, 指1升溶液中含有1摩爾溶質(zhì)，其液層厚度為1厘米時(shí)，在指定波長和一定條件（溶劑、pH、溫度）下的吸光度。 （1）摩爾吸光系數(shù)是吸收物質(zhì)在一定波長和溶劑條件下的特征常數(shù)；不隨濃度 c 和光程長度b 的改變而改變；在溫度和波長等條件一定時(shí)，僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān)，與待測物濃度無關(guān)；可作為定性鑒定的參數(shù)。,（2）同一吸收物質(zhì)在不同波

7、長下的值是不同的。在最大吸收波長max處的摩爾吸光系數(shù)，常以max表示。max表明了該吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力，也反映了光度法測定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。 105： 超高靈敏 =(610）104 ： 高靈敏 2104 ： 不靈敏,3.2 紫外分光光度法在定性分析中的應(yīng)用 鑒別,規(guī)定一定波長處的最大吸收（選1-4個(gè)波長）例1：丁溴東莨菪堿（抗膽堿藥） 鑒別,取本品，加0.01mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成每1ml中含1mg的溶液，照紫外-可見分光光度法測定，在252nm、257nm與264nm的波長處有最大吸收。,規(guī)定吸光度及吸光度范圍例2：比沙可啶（瀉藥）鑒別,取本品，加0.1mol/

8、L甲醇制氫氧化鉀溶液制成每1ml中含10g的溶液，照紫外-可見分光光度法測定，在248nm的波長處有最大吸收，其吸光度為0.620.68。,規(guī)定供試品溶液的最大max及最小min 吸收波長例3：乙胺嘧啶（抗瘧藥） 鑒別,取本品，精密稱定，加0.1mol/L鹽酸溶液溶解，并定量稀釋制成每1ml中約含13g的溶液，照紫外-可見分光光度法測定，在272nm的波長處有最大吸收，在261nm的波長處有最小吸收。,規(guī)定其在最大吸收波長與最小吸收波長處的吸光度比值，Amax/ Amin例4：尼群地平（鈣通道阻滯藥）鑒別,避光操作。取本品，加無水乙醇制成每1ml中約含20g的溶液，照紫外-可見分光光度法測定，

9、在236nm與353nm的波長處有最大吸收，在303nm的波長處有最小吸收。在353nm與303nm的波長處的吸光度比值應(yīng)為2.12.3。,3.3 紫外分光光度法在定量分析中的應(yīng)用, 郎伯-比爾定律 數(shù)學(xué)表達(dá)式： A= lg（1/T）=Ecl A：吸光度 T：透光率 E：吸收系數(shù) 當(dāng)溶液濃度為1%（g/ml），液層厚度為 1cm 時(shí)的吸光度數(shù)值 c: 100ml溶液中所含被測物質(zhì)的重量（按干燥品或無水物計(jì)算），g l: 液層厚度，cm,郎伯-比爾定律的適用范圍,標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定未知溶液的濃度時(shí)，發(fā)現(xiàn)：標(biāo)準(zhǔn)曲線常發(fā)生彎曲（尤其當(dāng)溶液濃度較高時(shí)），這種現(xiàn)象稱為對朗伯比耳定律的偏離。,郎伯-比爾定律的

10、適用范圍, 物理性因素單色光 朗伯比耳定律的前提條件之一是入射光為單色光。 分光光度計(jì)只能獲得近乎單色的狹窄光帶，非單色光、雜散光、非平行入射光都會引起對朗伯比耳定律的偏離，最主要的是非單色光作為入射光引起的偏離。,郎伯-比爾定律的適用范圍, 化學(xué)性因素稀溶液 只有在稀溶液 (c10 2 摩爾/L 時(shí)，吸光質(zhì)點(diǎn)間可能發(fā)生締合等相互作用，直接影響了對光的吸收。 故：朗伯比耳定律只適用于稀溶液。,3.3.1 紫外分光光度法在定量分析中的應(yīng)用 檢查,主要用于制劑的含量均勻度與溶出度的檢查，也有作為雜質(zhì)檢查的方法。 含量均勻度檢查 溶出度檢查 釋放度檢查 雜質(zhì)檢查：主要為比色法，其次是紫外光譜法。,例

11、1：卡比馬唑片（抗甲狀腺藥） 含量均勻度,取本品1片，置乳缽中研細(xì)，加水適量，研磨，照紫外-可見分光光度法，在292nm的波長處測定吸光度，按C7H10N2O2S（卡比馬唑）的吸收系數(shù)（E1cm1%）為557計(jì)算，即得。,例2：雙氯芬酸鈉腸溶片釋放度,取本品，照釋放度測定法（方法2）測定,采用溶出度測定法第一法裝置 。 供試品溶液1 ：0.1mol/L鹽酸溶液1000ml為釋放介質(zhì)，100轉(zhuǎn)/分鐘，2小時(shí)取樣； 供試品溶液2：磷酸鹽緩沖液（pH6.8）1000ml，100轉(zhuǎn)/分鐘，45分鐘取樣，取5ml10ml； 雙氯酚酸鈉對照品20mg100ml，水定容，作溶液A；取A液2ml100ml，0

12、.1mol/L鹽酸溶液定容，作為供試品溶液1的對照品溶液；A液5ml100ml，磷酸鹽緩沖液（pH6.8）定容，作為供試品溶液2的對照品溶液； 取供試品溶液與對照品溶液，照紫外-可見分光光度法，在276nm的波長處測定吸光度，計(jì)算每片的釋放量，應(yīng)符合規(guī)定。,例3：門冬酰胺（氨基酸類藥） “溶液的透光率”,取本品0.4g，加水20ml溶解后，照紫外-可見分光光度法，在430nm的波長處測定透光率，不得低于98.0%。,3.3.2 紫外分光光度法在定量分析中的應(yīng)用 含量測定, 單一組分含量測定 對照品比較法 吸收系數(shù)法 計(jì)算分光光度法, 對照品比較法 按各品種頊下的方法，分別配制供試品溶液和對照品

13、溶液，對照品溶液中所含被測成分的量應(yīng)為供試品溶液中被測成分規(guī)定量100%10%，所用溶劑也應(yīng)完全一致，在規(guī)定的波長處測定供試品溶液和對照品溶液的吸光度。,例1：奮乃靜片（抗精神病藥） 含量測定,避光操作。取本品20片，除去包衣后，精密稱定，研細(xì)， 精密稱取適量（約相當(dāng)于奮乃靜10mg），搖勻，作為供試品溶液；另取奮乃靜對照品，精密稱定，用溶劑溶解并定量稀釋制成每1ml中約含5g的溶液，作為對照品溶液。取上述兩種溶液，照紫外-可見分光光度法，在255nm的波長處分別測定吸光度，計(jì)算，即得。, 吸收系數(shù)法 按各品種項(xiàng)下的方法配制供試品溶液，在規(guī)定的波長處測定其吸光度，再以該品種在規(guī)定條件下的吸收系

14、數(shù)計(jì)算含量。用本法測定時(shí)，吸收系數(shù)通常應(yīng)大于100，并注意儀器的校正和檢定。,例2：枸櫞酸他莫昔芬片（抗腫瘤藥） 含量測定,取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于他莫昔芬10mg），搖勻，照紫外-可見分光光度法，在238nm的波長出測定吸光度，按C26H29NO的吸收系數(shù)為531計(jì)算，即得。,3.3.2 紫外分光光度法在定量分析中的應(yīng)用 含量測定, 多組分含量測定 解線性方程組法 等吸收點(diǎn)法 差示分光光度法 雙波長分光光度法 系數(shù)倍率法 三波長分光光度法 導(dǎo)數(shù)分光光度法 正交函數(shù)分光光度法,4、實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng),實(shí)驗(yàn)中所用的量瓶和移液管均應(yīng)經(jīng)檢定校正、 洗凈后使用。 吸收池：潔凈

15、、 配對（裝入同一種溶劑，在規(guī)定波長處測定，T%0.3%）、校正。,4、 實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng),操作：手持位置、裝液體積、加蓋、 擦拭方向、 放入方向、清洗 除污染洗滌：硫酸發(fā)煙硝酸 3：1(v:v)、鉻酸鉀清洗液。,4、實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng),溶劑應(yīng)符合要求 在測定供試品前，應(yīng)先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求，即將溶劑置1cm石英吸收池中，以空氣為空白（即空白光路中不置任何物質(zhì)）測定其吸光度。溶劑和吸收池的吸光度： 在220240nm范圍內(nèi)不得超過0.40， 在241 250nm范圍內(nèi)不得超過0.20， 在251 300nm范圍內(nèi)不得超過0.10， 在300nm以上不得超過0.05。

16、,4、實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng),制樣方法：稱量、稀釋、平行制樣 供試品溶液濃度：吸光度范圍 0.30.7（誤差?。?儀器狹縫寬度：2nm（供試品吸收帶半高寬的10%） 吸收峰選擇： 2nm pH值的一致性,5、儀器的校正與檢定,4.1 波長準(zhǔn)確度 汞燈譜線（nm）： 237.83 、 253.65 、 275.28 、 296.73 、 313.16 、 334.15 、 365.02 、 404.66 、 435.83 、 546.07 、 576.96,5.1 波長準(zhǔn)確度 儀器氘燈譜線（nm）： 486.02 、656.10 鈥玻璃譜線（nm）： 279.4、287.5、333.7、 360.9、

17、418.5、460.0、484.5、536.2、637.5,5.1 波長準(zhǔn)確度 用高氯酸狄溶液檢定雙光束儀器（nm）： 241.13、278.10、287.18、333.44、 345.47、361.31、416.28、451.30、 485.29、536.64、640.52 以10%高氯酸溶液為溶劑，配制含氧化鈥4%的溶液。,波長準(zhǔn)確度允許誤差： 紫外區(qū): 1nm 500 nm 處： 2nm,5.2 吸光度的準(zhǔn)確度 可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。取在120干燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀約60mg，精密稱定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀釋至1000ml，在規(guī)定的波長處測定并計(jì)算其吸收系數(shù)，并

18、與規(guī)定的吸收系數(shù)比較，應(yīng)符合表中的規(guī)定。,5.2 吸光度的準(zhǔn)確度,5.3 雜散光的檢查 按下表所列的試劑和濃度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在規(guī)定的波長處測定透光率，應(yīng)符合表中的規(guī)定。,中國藥典2005年版與2010年版附錄的比較,二、可見分光光度法,內(nèi)容簡介： 1、概念 2、比色法適用范圍 3、顯色反應(yīng)的要求 4、顯色反應(yīng)的主要類型 5、顯色反應(yīng)的影響因素,1、 比色法定義,比色法是經(jīng)典的光度分析法，現(xiàn)代的比色分析采用分光光度計(jì)進(jìn)行測定，即可見分光光度法，定量分析的依據(jù)是比爾定律。,2、 比色法適用范圍,有色物質(zhì)，無色但經(jīng)顯色反應(yīng)可以生成顏色的物質(zhì)都可以采用本法在適宜的條件下進(jìn)行定量

19、分析。而在紫外光區(qū)吸收弱或無吸收的化合物通過適宜的顯色反應(yīng)，生成有色化合物進(jìn)行測定，可以提高測定的靈敏度，當(dāng)多組分共存時(shí)可以提高分析的選擇性。藥物分析工作中，可見分光光度法在藥物的雜質(zhì)檢查、溶出度、均勻度的測定、含量測定等都有應(yīng)用 。,3、 顯色反應(yīng)的要求,選擇性強(qiáng) 靈敏度高 穩(wěn)定性好 生成物的組成恒定 試劑在測定波長應(yīng)不干擾反應(yīng)生成物的測定,4、 顯色反應(yīng)的類型（主要）,配位反應(yīng)(絡(luò)合反應(yīng)) 氧化還原反應(yīng) 縮合反應(yīng),例1：水楊酸鑒別,取本品的水溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。 原理：水楊酸在中性或弱酸性條件下，與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成紫堇色配位化合物。（配位反應(yīng)）,例2：維生素E鑒別,

20、取本品約30mg，加無水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，搖勻，在75加熱約15分鐘，溶液顯橙色。 原理：維生素E在硝酸酸性條件下，水解生成生育酚，生育酚被硝酸氧化為鄰醌結(jié)構(gòu)的生育紅而顯色。 （氧化還原反應(yīng)）,例3：鹽酸維拉帕米鑒別,取本品水溶液（120）2ml，加硫氰酸鉻銨試液5滴，即生成淡紅色的沉淀。 原理：鹽酸維拉帕米含叔胺基，與硫氰酸鉻銨反應(yīng)，生成淡紅色的沉淀。（縮合反應(yīng)）,5、顯色反應(yīng)的影響因素,(1) 溶劑：易溶、穩(wěn)定、不易揮發(fā) (2) 反應(yīng)的酸堿度 (pH值)：進(jìn)行和完全程度。 配位顯色反應(yīng)：配位試劑多為弱酸,酸度影響配位試劑的有效濃度，； 氧化還原反應(yīng)：當(dāng)含氧酸作氧化劑參與反應(yīng)

21、時(shí)，H+會影響氧化劑的電位。,5、顯色反應(yīng)的影響因素 (3) 試劑的用量：反應(yīng)完全、顯色穩(wěn)定 (4) 反應(yīng)的溫度：室溫 (5) 反應(yīng)的時(shí)間和穩(wěn)定的時(shí)間,玻璃酸鈉-含量測定（國家藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)）,對照品溶液的制備：取葡萄糖醛酸內(nèi)酯約10mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加水溶解，并稀釋至刻度，搖勻。精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，即得。 供試品溶液的制備：取玻璃酸鈉約10mg，精密稱定，置250ml量瓶中，加水稀釋至刻度，即得。 測定法：精密量取對照品溶液與供試品溶液各1ml，分別置具塞試管中，將試管置冰鹽水浴中。精密量取硼砂-硫酸液5ml，緩緩加入試管中，振搖混勻后，

22、放置20分鐘，在冰鹽水浴中，精密加入咔唑液0.2ml，搖勻，在沸水浴中加熱15分鐘，取出，放冷至室溫，照分光光度法，在530nm的波長處，分別測定吸光度，計(jì)算結(jié)果，即得。,正常情況： 空白無色 樣品紫紅色,異常情況： 空白深藍(lán)綠色 樣品暗紫色,原因：?,容器的清潔?,咔唑試劑？,反應(yīng)試劑： 硫酸的純度,三、紅外分光光度法,內(nèi)容簡介： 1、紅外光譜圖介紹 2、紅外吸收光譜的成因 3、基團(tuán)頻率和特征吸收峰表 4、影響基團(tuán)頻率位移的因素 5、紅外光譜圖的錄制方法及操作注意事項(xiàng) 6、紅外分光光度法的應(yīng)用 7、紅外分光光度計(jì)的檢定,三、紅外分光光度法,1、紅外光譜圖的構(gòu)成,2、中紅外區(qū)的劃分,基團(tuán)頻率區(qū)

23、（官能團(tuán)區(qū)）: 4000 cm-1 1300cm-1 該區(qū)域出現(xiàn)的吸收峰較為稀疏，容易辨認(rèn)。 指紋區(qū)：1300 cm-1 600 cm-1 該區(qū)域主要是：C-C，C-N，C-O等單鍵和各種彎曲振動的吸收峰，其特點(diǎn)是譜帶密集、難以辨認(rèn)。,3、紅外吸收光譜的成因,滿足兩個(gè)條件： (1)輻射應(yīng)具有能滿足物質(zhì)產(chǎn)生振動-轉(zhuǎn)動躍遷所需的量； (2)輻射與物質(zhì)間有相互偶合作用，伴隨有偶極距的改變。,分子偶極矩的變化,應(yīng)注意：不是所有的振動都能引起紅外吸收，只有偶極矩()發(fā)生變化的，才能有紅外吸收。 H2、O2、N2 電荷分布均勻，振動不能引起紅外吸收。 HCCH、RCCR，其CC（三鍵）振動 也不能引起紅外

24、吸收。,4、基團(tuán)頻率和特征吸收峰,振動,吸收峰,化合物,C-H伸縮,C-H彎曲,烷烴,2960-2850cm-1,-CH2-, 1460cm-1 -CH3 , 1380cm-1 異丙基，兩個(gè)等強(qiáng)度的峰 叔丁基，兩個(gè)不等強(qiáng)度的峰,振動,吸收峰,化合物,C-H拉伸（或伸縮）(cm-1),C=C，CC，C=C-C=C苯環(huán)(拉伸或伸縮) (cm-1),C-H彎曲 (cm-1),烯烴,1680-1620,1000-800,RCH=CH2 1645（中） R2C=CH2 1653（中） 順RCH=CHR 1650（中） 反RCH=CHR 1675（弱）,3000 （中）,3100-3010,三取代 168

25、0（中-弱）,四取代 1670（弱-無）,四取代 無,共軛烯烴,與烯烴同,向低波數(shù)位移，變寬,與烯烴同,910-905強(qiáng),995-985強(qiáng),895-885強(qiáng),730-650弱且寬,980-965強(qiáng),840-790強(qiáng),無,強(qiáng),吸收峰,化合物,振動,C-H伸縮 (cm-1),C=C，CC，C=C-C=C 苯環(huán)(cm-1),C-H彎曲 (cm-1),炔烴,3310-3300,一取代 2140-2100弱,非對稱二取代2260-2190弱,700-600,3110-3010中,1600中,670弱,倍頻 2000-1650,鄰- 770-735強(qiáng),間- 810-750強(qiáng) 710-690中 對- 833

26、-810強(qiáng),泛頻 2000-1660,取代芳烴,較強(qiáng),對稱 無,強(qiáng),同芳烴,同芳烴,1580弱,1500強(qiáng),1450弱-無,一取代770-730， 710-690強(qiáng),二取代,芳烴,類 別,伸 縮(cm-1),說 明,R-X,C-F C-Cl C-Br C-I,1350-1100強(qiáng)750-700 中 700-500 中 610-685 中,游離 3650-3500締合3400-3200寬峰,不明顯,醇、酚、醚,-OH,C-O,1200-1000,不特征,胺,RNH2 R2NH,3500-3400（游離）締合降低100,3500-3300（游離）締合降低100,鍵和官能團(tuán),類別,伸 縮 (cm-1

27、),說 明,1770-1750（締合時(shí)在1710）,醛、酮,C=O,R-CHO,1750-1680,2720,羧酸,C=O,OH,酸酐,酰鹵,酰胺,腈,氣相在3550，液固締合時(shí)在3000-2500（寬峰）,C=O,C=O,C=O,C=O,酯,1800,1860-1800 1800-1750,1735,NH2,1690-1650,3520，3380（游離）締合降低100,CN,2260-2210,鍵和官能團(tuán),5、影響基團(tuán)頻率位移的因素,影響基團(tuán)頻率位移的因素大致可分為內(nèi)部因素和外部因素。,5、影響基團(tuán)頻率位移的因素,內(nèi)部因素： 1. 電子效應(yīng) 包括誘導(dǎo)效應(yīng)、共軛效應(yīng)和中介效應(yīng)，它們都是由于化學(xué)

28、鍵的電子分布不均勻引起的。 （1）誘導(dǎo)效應(yīng)（I 效應(yīng)） （2）共軛效應(yīng)(C效應(yīng)) （3）中介效應(yīng)（M效應(yīng)） （4）Fermi共振 2. 氫鍵的影響 3. 振動偶合,（1） 成鍵軌道類型 例如:,（2 ）誘導(dǎo)效應(yīng): 由于鄰近原子或基團(tuán)的誘導(dǎo)效應(yīng)的影響使基團(tuán)中電荷分布發(fā)生變化,從而改變了鍵的力常數(shù),使振動頻率發(fā)生變化。 例如:,（3）共軛效應(yīng) 由于鄰近原子或基團(tuán)的共軛效應(yīng)使原來基團(tuán)中雙鍵性質(zhì)減弱,從而使力常數(shù)減小,使吸收頻率降低。 例如:,（4）鍵張力的影響 主要是環(huán)狀化合物環(huán)的大小不同影響鍵的力常數(shù),使環(huán)內(nèi)或環(huán)上基團(tuán)的振動頻率發(fā)生變化.具體變化在不同體系也有不同. 例如: *環(huán)丙烷的C-H伸縮頻

29、率在3030 cm-1，而開鏈烷烴的C-H伸縮頻率在3000 cm-1以下。,（5） 氫鍵的影響 形成氫鍵后基團(tuán)的伸縮頻率都會下降。例如：乙醇的自由羥基的伸縮振動頻率是3640 cm-1，而其締合物的振動頻率是3350 cm-1。形成氫鍵還使伸縮振動譜帶變寬。 （6）振動的偶合 若分子內(nèi)的兩個(gè)基團(tuán)位置很近，振動頻率也相近，就可能發(fā)生振動偶合，使譜帶分成兩個(gè)，在原譜帶高頻和低頻一側(cè)各出現(xiàn)一個(gè)譜帶。例如乙酸酐的兩個(gè)羰基間隔一個(gè)氧原子，它們發(fā)生偶合。羰基的頻率分裂為1818和1750 cm-1。(預(yù)期如果沒有偶合其羰基振動將出現(xiàn)在約1760 cm-1)。 彎曲振動也能發(fā)生偶合。,5、影響基團(tuán)頻率位移

30、的因素,外部因素： 外部因素主要指測定時(shí)物質(zhì)的狀態(tài)以及溶劑效應(yīng) 等因素。 同一物質(zhì)的不同狀態(tài)，由于分子間相互作用力不同，所得到光譜往往不同。,物態(tài)變化的影響 通常同種物質(zhì)氣態(tài)的特征頻率較高，液態(tài)和固態(tài)較低。例如丙酮vC=O(氣)1738 cm-1， vC=O(液)1715 cm-1。溶劑也會影響吸收頻率。 在溶液中測定光譜時(shí)，由于溶劑的種類、溶劑的濃度和測定時(shí)的溫度不同，同一種物質(zhì)所測得的光譜也不同。通常在極性溶劑中，溶質(zhì)分子的極性基團(tuán)的伸縮振動頻率隨溶劑極性的增加而向低波數(shù)方向移動，并且強(qiáng)度增大。因此，在紅外光譜測定中，應(yīng)盡量采用非極性的溶劑 (四氯化碳、二硫化碳）。,6、紅外光譜圖的錄制,

31、 試樣的制備與處理,1、壓片法 2、糊法 3、膜法 4、溶液法 5、氣體吸收池法 麻醉藥品 6、衰減全反射法(ATR) 藥包材,1、壓片法,取供試品約11.5mg，置瑪瑙研缽中，加入干燥的溴化鉀或氯化鉀細(xì)粉約200300mg（與供試品的比約為200：1）作為分散劑，充分研磨混勻，置于直徑為13mm的壓片模具中，使鋪展均勻，抽真空約2分鐘，加壓至（0.8106）kPa（約810T/cm2），保持壓力2分鐘，撤去壓力并放氣后取出制成的供試片，目視檢測，片子應(yīng)呈透明狀，其中樣品分布應(yīng)均勻，并無明顯的顆粒狀樣品。,例1：氫氯噻嗪的鑒別（3） 本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集285圖）一致。（

32、 KBr壓片法） 例2：鹽酸地芬尼多的鑒別（3） 本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集338圖）一致。（ KCl壓片法）,2、糊法,取供試品約5mg，置瑪瑙研缽中，粉碎研細(xì)后，滴加少量液狀石蠟或其它適宜的糊劑，研成均勻的糊狀物，取適量糊狀物夾于兩個(gè)窗片或空白溴化鉀片（每片約150mg）之間，作為供試片，另以溴化鉀約300mg制成空白片作為補(bǔ)償。亦可用專用裝置夾持糊狀物。制備時(shí)應(yīng)注意盡量使糊狀樣品在窗片間分布均勻。 石蠟糊的特征吸收：30002850cm-1，1460cm-1 、 1378cm-1 、720 cm-1,例3：棕櫚氯霉素的鑒別（2） 取本品（A晶型或B晶型），用糊法測定，其紅

33、外光吸收圖譜應(yīng)與同晶型對照的圖譜（光譜集37圖或38圖）一致。 （糊法）,3、膜法,將能形成薄膜的液體樣品鋪展于適宜的鹽片中，使形成薄膜后測定。若為高分子聚合物，可先制成適宜厚度的高分子薄膜，直接置于樣品光路中測定。熔點(diǎn)較低的固體樣品可采用熔融成膜的方法制樣。,例4：二甲硅油的鑒別（2） 本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集10圖）一致。（膜法）,4、溶液法,將供試品溶于適宜的溶劑中，制成110%濃度的溶液，灌入適宜厚度的液體池中測定。常用溶劑有四氯化碳、三氯甲烷、二硫化碳、己烷、環(huán)己烷及二氯乙烷等。選用溶液應(yīng)在被測定區(qū)域中透明或僅有中弱的吸收，且與樣品間的相互作用應(yīng)盡可能小。 溶劑干燥

34、 宜選用固定光程長度的液體池 勞動保護(hù),例5：西甲硅油乳劑的鑒別 供試品溶液：取本品約1g，置錐形瓶中，加鹽酸溶液（1mol/L）50ml和二硫化碳25ml，強(qiáng)烈振搖5min后，移至分液漏斗中，待分層后，分取二硫化碳層，經(jīng)無水硫酸鈉濾過得澄清濾液，置0.5mm吸收池中，繪制紅外光吸收圖譜； 對照品溶液：取聚二甲基硅氧烷對照品，加二硫化碳制成每1ml含2mg的溶液與供試品相同條件下繪制紅外光吸收圖譜； 結(jié)果判定：供試品所得圖譜應(yīng)與對照品在1400 cm-1至700 cm-1范圍內(nèi)的圖譜一致。, 測量操作注意事項(xiàng),1、環(huán)境條件 紅外實(shí)驗(yàn)室的室溫應(yīng)控制在1530，相對濕度應(yīng)小于65% 。 2、背景補(bǔ)

35、償或空白校正。 3、采用壓片法時(shí)，以溴化鉀最常用。若供試品為鹽酸鹽，可比較氯化鉀壓片和溴化鉀壓片法的光譜，若二者沒有區(qū)別，則使用溴化鉀。, 測量操作注意事項(xiàng),4、供試品研磨應(yīng)適度，通常以粒度25m為宜。 5、壓片模具及液體吸收池等紅外附件，使用完后應(yīng)及時(shí)清洗，保存在干燥器中。,7、紅外分光光度法的應(yīng)用 藥物定性、定量分析, 定性分析鑒別實(shí)驗(yàn),7.1 原料藥鑒別 除另有規(guī)定外，應(yīng)按照國家藥典委員會編訂的藥品紅外光譜集各卷收載的各光譜圖所規(guī)定的方法制備樣品。具體操作技術(shù)參見藥品紅外光譜集的說明。,例1：桂利嗪（血管擴(kuò)張藥） 紅外鑒別,本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集306圖）一致。 （K

36、Br壓片法）,例2：西咪替?。℉2受體阻滯藥） 紅外鑒別,本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集142圖）一致。 （KBr壓片法） 光譜集中注明：取供試品1g，置錐形瓶中，加異丙醇5ml，回流至完全溶解，冷卻析出結(jié)晶，濾過，真空干燥后測定。,多晶現(xiàn)象 當(dāng)采用固體制樣技術(shù)不能滿足鑒別需要時(shí)，可改用溶液法繪制光譜后比對。, 定性分析鑒別實(shí)驗(yàn),7.2 制劑鑒別 品種鑒別項(xiàng)下應(yīng)明確規(guī)定制劑的前處理方法，通常采用溶劑提取法。提取時(shí)應(yīng)選擇適宜的溶劑，以盡可能減少輔料的干擾，并力求避免導(dǎo)致可能的晶型轉(zhuǎn)變。提取的樣品在經(jīng)適當(dāng)干燥后依法進(jìn)行紅外光譜鑒別。,例1：雙嘧達(dá)莫片 紅外鑒別,取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于

37、雙咪達(dá)莫100mg），加三氯甲烷10ml，研磨溶解，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?jīng)減壓干燥，依法測定。本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集557圖）一致。 （KBr壓片法）,例2：醋酸甲羥孕酮片 紅外鑒別,取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于醋酸甲羥孕酮100mg），加三氯甲烷10ml，研磨溶解，濾過，濾液水浴蒸干，殘?jiān)?jīng)減壓干燥，依法測定。本品的紅外光吸收圖譜除750cm-1外應(yīng)與對照的圖譜（光譜集160圖）一致。 （KBr壓片法）, 定性分析注意點(diǎn),1、各品種項(xiàng)下規(guī)定“應(yīng)與對照的圖譜（光譜集圖）一致”，系指藥品紅外光譜集各卷所載的圖譜。同一化合物的圖譜若在不同卷上均有收載時(shí)，則以后卷所載的圖譜為準(zhǔn)。, 定性分析注意點(diǎn),2、藥物制劑經(jīng)提取