1、細(xì)菌感染的非培養(yǎng)檢測(cè)方法,華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科,主要方法,免疫學(xué)檢測(cè) 分子生物學(xué)檢測(cè) 細(xì)菌毒素檢測(cè) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn),免疫學(xué)檢測(cè),Ag+Ab AgAb 用已知抗體或抗原來(lái)檢測(cè)未知抗原抗體,抗體檢測(cè),已知抗體檢測(cè)未知抗原：效價(jià)（或滴度）的升高 診斷血清 多價(jià)血清 單價(jià)血清 因子血清,抗原檢測(cè),凝集試驗(yàn) 玻片凝集試驗(yàn) 乳膠凝集試驗(yàn) 反向間接凝集試驗(yàn) SPA協(xié)同凝集試驗(yàn) 免疫熒光技術(shù) ELISA,含A蛋白 的金葡菌,IgG類抗體,結(jié)合IgG的金葡菌,抗 原,凝集,協(xié)同凝集試驗(yàn),細(xì)菌毒素的檢測(cè),內(nèi)毒素的檢測(cè)：G-細(xì)菌感染 外毒素的檢測(cè)：待檢菌的鑒定，并區(qū)分產(chǎn)毒株與非產(chǎn)毒株,動(dòng)物實(shí)驗(yàn),分離和鑒定病原微生物

2、 測(cè)定細(xì)菌的毒力 制備免疫血清 建立致病動(dòng)物模型 取動(dòng)物的血清配制培養(yǎng)基 用于生物制品或一些藥物的安全、毒性、療效檢驗(yàn),細(xì)菌感染的分子生物學(xué)檢測(cè),分子診斷極大的節(jié)約時(shí)間,針對(duì)傳染病的分子診斷技術(shù)被國(guó)際權(quán)威的自然、科學(xué)雜志列為改善發(fā)展中國(guó)家人民健康的十大生物技術(shù)之首！,細(xì)菌感染的分子生物學(xué)檢測(cè),核酸雜交 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR） 生物芯片技術(shù),核酸雜交,核酸探針：帶有標(biāo)記物的、能與特定核酸序列發(fā)生特異性互補(bǔ)的已知序列核酸片段。 核酸雜交方法： 1.斑點(diǎn)雜交 2.菌落原位雜交 3.Southern印跡 4.Northern印跡,核酸雜交在臨床微生物檢測(cè)中的應(yīng)用,細(xì)菌分類鑒定 細(xì)菌快速鑒定 細(xì)菌耐藥性

3、的檢測(cè) 細(xì)菌毒素的檢測(cè) 細(xì)菌流行病學(xué)調(diào)查,聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction,PCR）,PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析,凝膠電泳分析法 斑點(diǎn)雜交法 酶譜分析法 序列分析法,PCR在臨床微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用,細(xì)菌的快速檢測(cè) 細(xì)菌毒素的檢測(cè) 細(xì)菌的耐藥性的檢測(cè) 細(xì)菌流行病學(xué)調(diào)查,基因芯片技術(shù),最早的生物芯片,概念源于計(jì)算機(jī)芯片,基本原理：微陣列技術(shù)，核苷酸固定到固體支持物上，將處理好的樣品與其進(jìn)行雜交，以實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)樣品基因的大規(guī)模檢驗(yàn)。,特點(diǎn)：高通量、高集成、微型化、平行化、多樣化和自動(dòng)化,1998年度世界10大科技進(jìn)展之一,發(fā)展迅速，應(yīng)用日益廣泛,基因芯片應(yīng)用存在的問(wèn)題,不同實(shí)

4、驗(yàn)室結(jié)果的比較,芯片價(jià)格，實(shí)驗(yàn)成本,微陣列質(zhì)量控制MAQC,蛋白質(zhì)芯片的強(qiáng)勢(shì)挑戰(zhàn),自身存在的技術(shù)缺陷,蛋白質(zhì)芯片技術(shù),雙向凝膠電泳(2-DE)和質(zhì)譜(MS)分析鑒定技術(shù)為蛋白質(zhì)組學(xué)研究的兩大核心技術(shù),蛋白質(zhì)芯片是指以蛋白質(zhì)分子作為配基,將其固定在固相載體的表面,形成的蛋白質(zhì)微陣列,分類：生物化學(xué)型芯片、化學(xué)型芯片和縮微芯片,蛋白質(zhì)芯片技術(shù)是繼基因芯片之后，被稱為橫掃生物科學(xué)和醫(yī)學(xué)界的一次“迷你”革命,分子診斷的質(zhì)量控制,標(biāo)準(zhǔn)化操作程序（SOP) 標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室 室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng),The FDA is Coming!,方法原理、實(shí)驗(yàn)步驟、使用指征、報(bào)告格式，結(jié)果、標(biāo)本、臨床有效性等因素,傳統(tǒng)方法目前不可替代 快速簡(jiǎn)便的分子診斷技術(shù)越來(lái)越普及 Jan Weile & Cornelius Knabbe；Current applications and future trends of molecular diagnostics in clinical bacteriology；Anal Bioanal Chem (2009) 394:731742,本章要求掌握的內(nèi)容,細(xì)菌感染的病原學(xué)診斷方法有哪些？ 細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查包括：不染色標(biāo)本檢查法和染色標(biāo)本檢查法 細(xì)菌染色常用染料：堿性染料、酸性染料、復(fù)合染料 常用染色方法：革蘭染色、抗酸染色和熒光染色,本章要求掌握的內(nèi)容,常用