1、,醫(yī)院感染微生物學(xué)監(jiān)測,*省人民醫(yī)院 感染管理科 *, 感染暴發(fā)或感染流行時，環(huán)境因素在感染中有流行病學(xué)意義, 監(jiān)測潛在的危險環(huán)境，證明有危險的病原體存在或證明危險 病原體已被成功清除, 當(dāng)某項感染控制措施改變時，評價其效果；或根據(jù)要求，儀器設(shè)備或系統(tǒng)啟用時進(jìn)行監(jiān)測, 詢證醫(yī)學(xué)證據(jù)支持,采樣后應(yīng)盡快對樣品進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)的檢測 送檢時間不得超過4h 若樣品保存于04時 送檢時間不得超過24h,采樣和檢查原則醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(2011),不推薦醫(yī)院常規(guī)開展滅菌物品的無菌檢查 當(dāng)流行病學(xué)調(diào)查懷疑醫(yī)院感染事件 與滅菌物品有關(guān)時，進(jìn)行相應(yīng)物品的無菌檢查 常規(guī)監(jiān)督檢查可不進(jìn)行致病性微生物檢測 涉及疑似醫(yī)院感

2、染暴發(fā)、醫(yī)院感染暴發(fā)調(diào)查 或工作中懷疑微生物污染時 應(yīng)進(jìn)行目標(biāo)微生物的檢測,采樣和檢查原則醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(2011),采樣和檢查原則醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(2011),可使用經(jīng)驗證的現(xiàn)場快速檢測儀器進(jìn)行環(huán)境、物體表面等微生物污染情況 和醫(yī)療器材清潔度的監(jiān)督篩查 也可用于醫(yī)院清洗效果檢查和清洗程序的評價和驗證,ATP熒光檢測儀,醫(yī)院消毒技術(shù)規(guī)范(2011) 醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(2011) 醫(yī)院感染管理規(guī)范,監(jiān) 測 內(nèi) 容, 醫(yī)院空氣微生物學(xué)監(jiān)測, 物體表面微生物學(xué)監(jiān)測, 使用中消毒劑微生物學(xué)監(jiān)測, 醫(yī)務(wù)人員手微生物學(xué)監(jiān)測, 壓力蒸汽滅菌效果生物監(jiān)測, 環(huán)氧乙烷滅菌效果生物監(jiān)測, 醫(yī)療器械消毒效果監(jiān)測,

3、 醫(yī)院治療用水的細(xì)菌學(xué)檢測, 血液透析液內(nèi)毒素監(jiān)測,采樣時間,消毒后 操作前,監(jiān)測方法,沉降法,重力沉降（平板沉降法） 靜電沉降 熱沉降,浮游菌測定法,撞擊式空氣微生物采樣法 離心式空氣微生物采樣法 洗刷式空氣微生物采樣法 過濾空氣微生物采樣法 溫差空氣微生物采樣法 靜電或沖擊空氣微生物采樣法,未采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間： 平板暴露法,室內(nèi)面積30m2 設(shè)內(nèi)、外、中 對角線3點 內(nèi)、外點距離墻壁1m處,室內(nèi)面積30m2 設(shè)四角及中央共5點 四角距離墻壁1m處,1、平板暴露法 2、空氣采樣器法 參照GB50333-2002（醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范）,采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間：,手術(shù)區(qū)：手

4、術(shù)臺及其周圍的區(qū)域,級手術(shù)室 (手術(shù)區(qū)百級，周圍千級）： 手術(shù)臺兩側(cè)邊至少各外推0.9m 兩端至少各外推0.4m后（包括手術(shù)臺）的區(qū)域,級手術(shù)室 (手術(shù)區(qū)千級，周圍萬級）： 手術(shù)臺兩側(cè)邊至少各外推0.6m 兩端至少各外推0.4m后（包括手術(shù)臺）的區(qū)域,級手術(shù)室（手術(shù)區(qū)域萬級，周圍十萬級）： 手術(shù)臺四邊至少各外推0.4m后（包括手術(shù)臺）的區(qū)域,級手術(shù)室（三十萬級）：不分手術(shù)區(qū)和周邊區(qū),周圍區(qū)：除去手術(shù)區(qū)以外的其他區(qū)域,平板暴露法,局部百級 周圍千級設(shè)置13點,局部千級 周圍萬級設(shè)置9點,局部萬級 周圍十萬級設(shè)置7點,局部十萬級 周圍三十萬級設(shè)置5點,?,醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范 GB50333

5、-2002,當(dāng)用沉降法測定沉降菌濃度時 細(xì)菌濃度測點數(shù)既要不少于被測區(qū)域含塵濃度測點數(shù) 又應(yīng)滿足沉降菌最少培養(yǎng)皿數(shù),被測區(qū)域潔凈度的級別 最少培養(yǎng)皿數(shù)（90，30min計） 100級 13 1000級 5 10000級 3 100000級 2 300000級 2,局部千級設(shè)置5點 周圍萬級設(shè)置4點,局部百級設(shè)置13點 周圍千級設(shè)置6點,局部萬級設(shè)置3點 周圍十萬級設(shè)置2點,局部十萬級設(shè)置2點 周圍三十萬級設(shè)置2點,操作方法,將平皿（直徑9cm）放置在采樣點處 采樣高度距離地面80-100cm 采樣時將平皿蓋打開、扣放于平板旁,采樣時，必須有2次空白對照 第1次對用于檢測的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條做對比

6、試驗 每一批做一個對照皿 第2次是在檢測時，每區(qū)或每室1個對照皿 對操作試驗做對照試驗 模擬操作過程 但培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條打開后又迅速封蓋 兩次對照試驗都必須為陰性 整個操作過程都必須無菌操作,未采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間暴露5min 采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間暴露30min,未采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間 類環(huán)境暴露15min 、類環(huán)境暴露5min 采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間暴露30min,采樣后蓋好平皿蓋子 記錄采樣時間,采樣平皿6h內(nèi)送實驗室培養(yǎng) 置361恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h 計數(shù)每個平板的菌落總數(shù),若懷疑與醫(yī)院感染有關(guān)時 進(jìn)行目標(biāo)微生物檢測,平板暴露法采樣注意事項：,布點應(yīng)盡量避開高效送風(fēng)

7、口正下方,放置培養(yǎng)皿時 應(yīng)從最里面的房間或房間的最里面開始布點 依次向外 最后人員撤出,收集培養(yǎng)皿時 從最外面的房間或房間的最外面開始 最先布的點最后收,采樣前關(guān)閉門窗 無人走動的情況下 靜止10分鐘后采樣,對檢測人員的要求：,著無菌的工作服、戴口罩、帽子 操作前洗手或手衛(wèi)生,手臂及頭部不可越過打開的培養(yǎng)皿上方,行動及放置動作要輕 盡量減少對空氣流動狀態(tài)的影響,每次采樣人員不得超過2人,所帶物品徐清潔后方可帶入,結(jié)果計算,奧梅良斯基公式（奧氏公式）： 5分鐘在100cm2的面積上降落的細(xì)菌數(shù) 相當(dāng)于10L空氣中所含的細(xì)菌數(shù),細(xì)菌數(shù)（cfu/m3)=,50000N,At,t-平皿暴露于空氣中的時

8、間（分鐘） N-培養(yǎng)后，平皿上的細(xì)菌總數(shù) A-所用平皿的面積,（2002版消毒技術(shù)規(guī)范）,2011年消毒技術(shù)規(guī)范,平板暴露法 按平均每皿的菌落數(shù)報告：cfu/皿暴露時間,例如： 產(chǎn)房30m2 放置平皿5個 放置15min 培養(yǎng)后5個平皿共長菌落15個 該產(chǎn)房空氣培養(yǎng)的結(jié)果為 平均每皿的菌落數(shù) 3cfu/皿15min,空氣采樣器法（浮游菌測定法）,二級 撞擊式空氣采樣儀,六級 撞擊式空氣采樣儀,八級 撞擊式空氣采樣儀,推薦使用六級撞擊式空氣采樣器 或其他經(jīng)驗證的空氣采樣器,6層有微小孔眼的鋁合金圓盤 圓盤下放瓊脂平皿 圓盤間有密封膠圈 通過三個彈簧卡子把圓盤固定聯(lián)在一起 標(biāo)準(zhǔn)采樣流量為1立方尺2

9、8.3L/min, 提前聯(lián)系需采樣的科室 安排好采樣的時間以及房間的準(zhǔn)備 百級潔凈房間至少已運行15分鐘 其余潔凈度房間至少已運行40分鐘,空氣采樣儀（浮游法）采樣步驟和方法, 采樣儀需提前充電10小時, 采樣點: 潔凈房間每間需要采樣至少2個點 一次采樣需要2個空白對照, 采樣的布點： 中央?yún)^(qū)和周邊區(qū) 房間大于10m2 每增加10m2 增設(shè)一個采樣點 在平皿上要標(biāo)注房間號和采樣區(qū)域及采樣時間, 采樣的高度： 將采樣器置于室內(nèi)中央0.8m1.5m高度, 采樣的角度： 在100級區(qū)域檢測時，采樣口應(yīng)對著氣流方向 在其他級別區(qū)域檢測時，采樣口均向上, 采樣的時長： 百級中央?yún)^(qū)30分鐘 其余潔凈房間

10、均為10分鐘（至少2分鐘） 采樣時間不應(yīng)超過30min, 采樣時要注意無菌操作： 操作者：帶口罩、帽子，穿隔離衣 換鞋或穿鞋套；手衛(wèi)生 安裝進(jìn)氣蓋前需用酒精燈滅菌進(jìn)氣端蓋正反兩面, 空白對照的設(shè)置： 空白對照1：培養(yǎng)皿不打開 空白對照2：模擬操作過程 但培養(yǎng)皿打開后又立封蓋 兩次對照必須均為陰性。,被測區(qū)域潔凈度級別 最小采樣量m3(L) 100級 0.6(600)1000級 0.06(60) 10000級 0.03(30)100000級 0.006(6) 300000級 0.006(6),浮游菌法最小采樣量,培養(yǎng)皿的準(zhǔn)備要求,配置平皿的試驗臺需要使用水平儀提前校正 保證加注培養(yǎng)基后平民內(nèi)瓊脂

11、厚度均勻,需提前培養(yǎng)24h（為證實無菌）,空氣采樣器法計算公式,空氣中菌落總數(shù)（cfu/m3）,采樣器各平皿菌落數(shù)之和（cfu）,采樣速率（L/min) 采樣時間(min),1000,=,合格標(biāo)準(zhǔn),類環(huán)境：采用空氣潔凈技術(shù)的診所， 分潔凈手術(shù)部和其他潔凈場所,類環(huán)境：非潔凈手術(shù)部（室）；產(chǎn)房；導(dǎo)管室； 血液病區(qū)、燒傷病區(qū)等保護(hù)性隔離區(qū)； 重癥監(jiān)護(hù)病房；新生兒室等,類環(huán)境：消毒供應(yīng)中心的檢查包裝滅菌區(qū) 和無菌物品存放區(qū)；母嬰同室； 血液透析中心（室）；其他普通住院病區(qū),類環(huán)境：感染性疾病科門診和病區(qū)； 普通門急診及其檢查、 治療（注射、換藥等）室,類環(huán)境,潔凈手術(shù)部：要求符合GB50333要求,

12、類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)4cfu/15min平皿,、類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)5cfu/5min平皿,浮游菌測定法的優(yōu)點,能夠采集浮游在空氣中的微生物粒子 這種粒子可隨人們呼吸道運動進(jìn)入呼吸道 因而更具有衛(wèi)生學(xué)意義,采樣效率高 采樣量準(zhǔn)確 采樣時不受粒徑大小、沉降速度和氣流的影響 能準(zhǔn)確的表示出空氣中細(xì)菌的實際含量,采樣時間,消毒后,采樣方法,5cm 5cm滅菌規(guī)格板 放在被檢物體表面 用蘸有生理鹽水的棉拭子1支 在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂擦5次 并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子 被采表面100cm2，取全部面積 被采樣表面100cm2，取100cm2 剪去手接觸部分 將棉拭子投入裝有10ml無菌檢測用洗脫液的試管中送檢 門把手等

13、小型物體用棉拭子直接涂抹物體表面采樣,采樣物體表面有消毒劑殘留時 采樣液應(yīng)含有相應(yīng)中和劑,檢測方法,傾注法,充分振蕩采樣管 取不同稀釋倍數(shù)的的洗脫液1.0ml接種平皿 （每一標(biāo)本接種2個平皿） 將冷卻至4045的融化營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 （ 4548） 每皿傾注15-20ml （15-18ml） 361恒溫箱培養(yǎng)48h 計數(shù)菌落數(shù),懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時，進(jìn)行目標(biāo)微生物的檢測,涂抹法,將采樣試管充分振蕩或在混勻器上混勻30s 取100ul接種于平皿 均勻涂布 361恒溫箱培養(yǎng)48h 計數(shù)菌落數(shù),懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時，進(jìn)行目標(biāo)微生物的檢測,結(jié)果計算,規(guī)則物體表面,小型物體表面,例如： 手術(shù)室手術(shù)

14、床，面積100cm2 采樣面積100cm2,涂抹法接種 培養(yǎng)48h后 平皿上的菌落數(shù)為10cfu 手術(shù)床的菌落總數(shù) =（10100）/100 =10cfu/cm2,傾注法接種 培養(yǎng)48h后 平皿上的菌落數(shù)為100cfu 手術(shù)床的菌落總數(shù) =（10010）/100 =10cfu/cm2,合格標(biāo)準(zhǔn),使用中消毒液染菌量監(jiān)測,證明被污染的消毒劑可以成為醫(yī)療機構(gòu)感染和流行傳播的媒介已有50年的歷史 已經(jīng)有報告證明污染的消毒劑導(dǎo)致醫(yī)院感染的例子,消毒劑溶液中長菌常見有下列幾種原因：,消毒劑的配制問題,消毒劑的外源性污染,消毒劑的儲存問題,消毒劑本身成分的問題,美國CDC醫(yī)療機構(gòu)消毒滅菌指南2008,采 樣

15、 及 操 作 方 法,1、涂布法,用無菌吸管吸取消毒液1ml 加入9ml相應(yīng)中和劑中 充分振蕩或在混勻器上混勻30s 取200ul接種于培養(yǎng)基平皿表面 均勻涂布,每份樣品同時做2個平行樣 一個平皿置于20培養(yǎng)7d 觀察真菌的生長 另一平皿置于35恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)72h 計數(shù)菌落數(shù),懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)相關(guān)時 進(jìn)行目標(biāo)微生物檢測,消毒劑染菌量（cfu/ml）= 每個平皿上的菌落數(shù)50,結(jié)果計算,2、傾注法,用無菌吸管吸取消毒液1ml 加入9ml相應(yīng)中和劑中 充分振蕩或在混勻器上混勻30s 分別取500ul接種于2個滅菌平皿內(nèi) 加入已溶化的4548普通營養(yǎng)瓊脂1518ml 邊傾注邊搖勻 待瓊脂凝固,一

16、個平皿置于20培養(yǎng)7d 觀察真菌的生長 另一平皿置于361恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)72h 計數(shù)菌落數(shù),懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)相關(guān)時 進(jìn)行目標(biāo)微生物檢測,消毒劑染菌量（cfu/ml）= 每個平皿上的菌落數(shù)20,結(jié)果計算,中和劑,在微生物殺滅實驗中 用以消除試驗微生物與消毒劑的混懸液中 和微生物表面上殘留的消毒劑 使其失去對微生物的抑制和殺滅作用的試劑,中和劑選擇原則,本身對菌無影響,生成物對菌無影響,確能去除殺菌因子,常用消毒劑的中和劑,合格標(biāo)準(zhǔn),皮膚黏膜消毒劑染菌 10cfu/ml,滅菌劑染菌量 0cfu/ml,消毒劑染菌量 100cfu/ml,對未使用的低效消毒劑和皮膚黏膜用消毒劑 使用前應(yīng)按照使用中消毒

17、液染菌量的方法進(jìn)行細(xì)菌檢測 未檢出細(xì)菌為合格,消毒劑有效濃度的監(jiān)測,使用中消毒液的有效濃度應(yīng)該符合使用要求 連續(xù)使用消毒液應(yīng)定期進(jìn)行有效濃度測定 每日使用，每日監(jiān)測； 每周使用，每次使用前監(jiān)測；,遵循WS/T 313,中華人民共和國衛(wèi)生部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生規(guī)范,手術(shù)室 產(chǎn)房 母嬰室 新生兒室 口腔科 器官移植病房 層流潔凈病房 燒傷病房 血液透析室 導(dǎo)管室 ICU 感染性疾病科 等部門,醫(yī)療機構(gòu)應(yīng)每季度對,醫(yī)務(wù)人員手進(jìn)行消毒效果監(jiān)測,當(dāng)懷疑醫(yī)院感染暴發(fā) 與醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生相關(guān)時 應(yīng)及時進(jìn)行監(jiān)測 并進(jìn)行相關(guān)致病微生物的檢測,1、采樣時間,手衛(wèi)生后,接觸病人或診療操作之前,2、采樣方法,棉拭子

18、法,被檢人員五指并攏 用蘸有含相應(yīng)中和劑的棉拭子 在雙手手指屈面從指根到指尖往返涂擦2次 一只手的涂擦面積約30cm2 并隨之轉(zhuǎn)動采樣棉拭子,剪去操作者手接觸的部分 將棉拭子投入10ml含相應(yīng)中和液的試管中 立即送檢,3、檢測方法,同物體表面消毒效果檢驗方法,4、結(jié)果計算,5、合格標(biāo)準(zhǔn),、類區(qū)域：細(xì)菌菌落總數(shù)5cfu/cm2,類區(qū)域： 細(xì)菌菌落總數(shù)10cfu/cm2,類區(qū)域： 細(xì)菌菌落總數(shù)15cfu/cm2,不得檢出治病微生物,監(jiān)測時間：每周一次,指示菌株：嗜熱脂肪芽胞桿菌 （ATCC7953或SSIK31株）,培養(yǎng)基： 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基,該菌為需氧芽孢桿菌，革蘭氏染色呈紫色 細(xì)菌

19、芽胞孔雀綠著色 在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨瓊脂上表面呈粗糙呈米黃色,嗜熱脂肪芽胞桿菌（ATCC7953或SSIK31株）,最適生長繁殖溫度為5665，培養(yǎng)24h形成菌落 熱死亡時間為121,嗜熱脂肪芽孢桿菌菌片 染菌量為5105106cfu/片,檢測方法,將嗜熱脂肪芽胞桿菌菌片放入 滅菌的小紙袋內(nèi) 置于標(biāo)準(zhǔn)實驗包中心部位 標(biāo)準(zhǔn)生物監(jiān)測包應(yīng)置于滅菌器排氣口的上方 或廠家建議的滅菌器內(nèi)最難滅菌的部位,試驗包制作,3件平紋長袖手術(shù)衣 4塊小手術(shù)巾 2塊中手術(shù)巾 1塊大手術(shù)巾 30塊10cm10cm紗布敷料 裹成25cm30 cm30cm大小,經(jīng)過一個滅菌周期后 在無菌條件下取出試驗包 或通氣儲物盒中的指

20、示菌片 投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中 56培養(yǎng)48h 同時將未經(jīng)滅菌的菌片投入另一管培養(yǎng)基中作對照 觀察培養(yǎng)基顏色的變化,若指示菌片中的細(xì)菌未被殺滅 可分解培養(yǎng)基中的葡萄糖產(chǎn)酸 使指示劑溴甲酚紫 由原來的紫色變成黃色,對照管為黃色 滅菌合格仍為淡藍(lán)色 滅菌不合格為黃色,自含式生物指示劑,使用方法,經(jīng)過一個滅菌過程后 取出指示劑管 擠破內(nèi)含的安瓿 與對照管一起放入 56培養(yǎng)48h,結(jié)果判斷,滅菌合格,檢測管培養(yǎng)陰性 陽性對照管培養(yǎng)陽性 陰性對照管培養(yǎng)陰性,滅菌不合格,檢測管培養(yǎng)陽性 陽性對照管培養(yǎng)陽性 陰性對照管培養(yǎng)陰性,監(jiān)測時間：每滅菌批次,指示菌株：枯草桿菌黑色變種芽胞 （ATCC93

21、72）,培養(yǎng)基： 普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,檢測方法,取20ml一次性塑料或玻璃注射器 去掉針頭和針頭套 拔出針?biāo)?將指示劑帶孔的塑料蓋應(yīng)朝向注射器針頭處 將注射器針?biāo)ú迦朐?（不要接觸到生物指示劑） 用一條全棉小毛巾折成兩層包裹 置于紙塑包裝袋中 封袋,將常規(guī)生物監(jiān)測包放在 滅菌器最難滅菌的部位,同時設(shè)陰、陽性對照,滅菌周期完成后 立即將生物指示劑取出 361 培養(yǎng)7天,若用自含式生物指示劑 可直接擠碎置于37溫箱中 培養(yǎng)48h觀察結(jié)果,高度危險性醫(yī)療器械： 進(jìn)入正常無菌組織、脈管系統(tǒng)或有無菌體液（如血液）流過，若被微生物污染將導(dǎo)致極高感染危險的器材 如手術(shù)器械；穿刺針；腹腔鏡；活檢鉗；牙科手機

22、及其配套器械；心導(dǎo)管；植入物等,消毒效果：應(yīng)無菌生長,消毒水平：達(dá)到滅菌,中度危險性醫(yī)療器械： 直接、間接接觸粘膜的器材 如胃腸道內(nèi)鏡；氣管鏡；喉鏡；體溫表（口腔測溫表肛門測溫表）；呼吸機管道；麻醉劑管道；壓舌板；肛門直腸壓力測量導(dǎo)管等,消毒效果：菌落數(shù)應(yīng)20cfu/件、g或100cm2,消毒水平：高水平消毒或中水平消毒,氧氣濕化瓶、吸引器、嬰兒暖箱、加溫加濕罐等 宜采用高水平消毒,低度危險性醫(yī)療器械： 僅與完整皮膚接觸而不與粘膜接觸的器材 如聽診器；血壓計袖帶；病床圍欄、床面以及床頭柜、被褥；墻面；痰盂、尿壺、便器等,消毒效果：菌落數(shù)應(yīng)200cfu/件、g或100cm2,消毒水平：中水平消毒

23、或低水平消毒或保持日常清潔,在消毒或滅菌處理后 存放有效期內(nèi)采樣,采樣時間,可用破壞性方法取樣的，如一次性輸液（血）器、注射器和注射針等參照中華人民共和國藥典無菌檢查法進(jìn)行。,滅菌醫(yī)療器材的檢查方法,牙科手機采樣：應(yīng)在100級潔凈實驗室將每支手機分別置20-25mL采樣液的無菌大試管（內(nèi)徑25mm）中，液面高度為4.5cm，于旋渦混合器上洗滌震蕩30s，取洗脫液進(jìn)行無菌檢查。,對不能用破壞性方法取樣的醫(yī)療器材，應(yīng)在100級潔凈實驗室，用浸有無菌生理鹽水采樣液的棉拭子在被檢物體表面涂抹采樣，被采表面100cm2，取全部表面；被采表面100cm2，取100cm2；然后將采樣棉拭子進(jìn)行無菌檢查。,手

24、機采樣方法決定檢測結(jié)果！,棉簽涂擦法不能體現(xiàn)手機的無菌性！,（1）在潔凈度100級區(qū)域中進(jìn)行，嚴(yán)格無菌操作 （2）采樣后送檢時間不得超過6h 樣品保存于4，則不超過24h （3）如消毒因子為消毒劑，采樣液中應(yīng)加入中和劑 （4）采樣面積，100cm2 （5）設(shè)好陽性、陰性對照,注意事項：,不推薦醫(yī)院常規(guī)開展滅菌物品的無菌檢查,可用破壞性方法取樣的，應(yīng)在100級超凈工作臺稱取110g樣品，放入裝有10mL采樣液的試管內(nèi)進(jìn)行洗脫，取洗脫液接種平皿進(jìn)行菌落計數(shù)（cfu/g），必要時分離致病性微生物。,消毒醫(yī)療器材的檢查方法,可整件放入試管進(jìn)行洗脫的，用洗脫液浸沒后震蕩30s以上，取洗脫液接種平皿，進(jìn)行

25、菌落計數(shù)（cfu/件），必要時分離致病性微生物。,對不能用破壞性方法取樣的醫(yī)療器材，應(yīng)在100級超凈工作臺，用浸有無菌生理鹽水采樣液的棉拭子在被檢物體表面涂抹采樣，被采表面100cm2，取全部表面，被采表面100cm2，取100cm2，然后將采樣棉拭子進(jìn)行洗脫，取洗脫液接種平皿進(jìn)行菌落計數(shù)（cfu/ cm2），必要時分離致病性微生物。,采樣時間,消毒滅菌后 使用前,內(nèi)窺鏡消毒滅菌效果的生物監(jiān)測,采樣方法,監(jiān)測部位為內(nèi)鏡的內(nèi)腔面 用無菌注射器抽取50ml 含有相應(yīng)中和劑的洗脫液 從待檢內(nèi)鏡的活檢口注入內(nèi)鏡（使用蠕動泵） 用無菌試管從活檢出口收集注入的液體 2h內(nèi)送檢,檢測方法,將洗脫液充分混勻

26、取洗脫液1.0ml接種平皿 將冷卻至40- 45溶化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 每皿傾注15-20ml 36 1恒溫箱培養(yǎng)48h 計數(shù)菌落數(shù)（cfu/件）,將剩余洗脫液在 無菌條件下用濾過膜（0.45um）過濾濃縮 將濾過膜接種于凝固的營養(yǎng)瓊脂平板上 置36 1恒溫箱培養(yǎng)48h 計數(shù)菌落數(shù)（cfu/件）,合格標(biāo)準(zhǔn),消毒內(nèi)鏡 細(xì)菌總數(shù)20cfu/件,滅菌內(nèi)鏡 無任何細(xì)菌檢出,采樣時間,消毒滅菌后 使用前,呼吸機麻醉機等螺紋管消毒效果生物監(jiān)測,采樣方法,用蘸有相應(yīng)中和劑的長柄棉簽 在被檢螺紋管內(nèi)面反復(fù)涂擦 并同時轉(zhuǎn)動棉簽,剪去手接觸的部位 將棉簽投入10ml含相應(yīng)中和劑的 無菌生理鹽水試管 立即送檢,檢測方

27、法,同物體表面微生物學(xué)的檢測方法,結(jié)果計算,細(xì)菌總數(shù)（cfu/cm2）=,平板上的菌落數(shù)稀釋倍數(shù),采樣面積,采樣面積 = 棉簽涂抹采樣的長度螺紋管內(nèi)周長,血液透析相關(guān)治療用水的細(xì)菌學(xué)監(jiān)測,依據(jù)YY 0572血液透析和相關(guān)治療用水進(jìn)行檢測,監(jiān)測時間,最初監(jiān)測應(yīng)每周監(jiān)測1次 連續(xù)2次監(jiān)測結(jié)果符合要求后 改為每月1次,采樣點,血液透析器與復(fù)用系統(tǒng)連接處 或盡可能接近此處,采樣方法,用75%酒精擦拭采樣口 酒精自然風(fēng)干后打開采樣口 在透析液連續(xù)流動1min后 用無菌試管接取樣本3-4ml,檢驗方法,傾注法,將洗脫液充分混勻 取洗脫液1.0ml接種平皿 將冷卻至40- 45的胰蛋白酶大豆瓊脂 每皿傾注1

28、5-20ml 35- 37孵育48h 48h后若呈陰性 延時培養(yǎng)至72h 計數(shù)平板上的菌落數(shù),菌落總數(shù)(cfu/ml）=平板上的菌落數(shù),結(jié)果計算,無菌操作取100ul樣本 滴于培養(yǎng)皿表面 均勻涂抹 35- 37孵育48h 48h后若呈陰性 延時培養(yǎng)至72h 計數(shù)平板上的菌落數(shù),涂抹法,菌落總數(shù)(cfu/ml）=平板上的菌落數(shù)10,結(jié)果計算,透析用水細(xì)菌總數(shù),合格標(biāo)準(zhǔn),ISO 13959:2002 血液透析和相關(guān)治療用水,200cfu/ml,100cfu/ml,口腔科治療用水的細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)100cfu/mL,口腔科治療用水的細(xì)菌學(xué)監(jiān)測,直接取治療用水1mL接種平皿 37恒溫箱培養(yǎng)48h 計數(shù)細(xì)

29、菌菌落數(shù)。,檢測方法,合格標(biāo)準(zhǔn),血液透析用水內(nèi)毒素監(jiān)測 最初每周監(jiān)測1次 連續(xù)2次檢測結(jié)果符合要求后 應(yīng)至少每3月送檢1次,國際標(biāo)準(zhǔn)ISO 13959:血液透析和相關(guān)治療用水,水處理輸出端內(nèi)毒素含量應(yīng) 1EU/ml 血液透析器入口的輸出點內(nèi)毒素含量5EU/ml,樣本,反滲水 透析液,采集方法,容器 專用無熱源真空管,方法 用75%酒精擦拭采樣口 酒精自然風(fēng)干后打開采樣口 1分鐘后用無菌無熱源注射器針頭 深入采樣口內(nèi) 吸取樣本3-4ml,用75%酒精消毒無熱源真空管頂端 待酒精自然揮發(fā)后 將樣品注入真空管內(nèi) （不可打開真空管上方的紅色蓋子）,實驗方法,動態(tài)比濁法（儀器法）,注意事項,樣本采集、保

30、存、運送整個過程中 避免外來熱源的污染,采樣管抽真空 以防管內(nèi)壓力過高試管蓋崩掉,運輸過程中做好保護(hù)措施 以免運輸途中碰撞、破碎,每次送樣時需同時送3支與采樣時所用的 同一廠家、型號、批號的注射器,存在的問題,采樣管的選擇,送樣點,運輸,普通注射用水0.25EU/ml 內(nèi)毒素監(jiān)測用水0.003EU/ml,謝謝,產(chǎn)品資料： 注：圖片及文字介紹僅供參考，請以實物為準(zhǔn) 簡介： 我廠生產(chǎn)的 六級篩孔撞擊式空氣微生物采樣器，是一種雙功能階式多級撞擊采樣器，可廣泛地用于衛(wèi)生防疫、生物潔凈、制藥、發(fā)酵工業(yè)等環(huán)境中的監(jiān)測以及有關(guān)研究教學(xué)部門作空氣微生物的采樣研究，為評價空氣環(huán)境微生物污染危害及其防治措施提供依據(jù)。 特點： 六級篩孔撞擊式空氣微生物采樣器能夠測定空氣微生物的數(shù)量之外，它獨有的特性是還能