1、名校名 推薦專(zhuān)題 5 課題 1dna的粗提取與鑒定（測(cè)）（滿(mǎn)分 60 分， 40 分鐘完成）班級(jí)姓名總分一、單選題（30 分，每題 3 分）1. 在利用雞血進(jìn)行“dna的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中，相關(guān)的敘述正確的是（）a用蒸餾水將nacl 溶液濃度調(diào)至0.14mol/l ，濾去析出物b調(diào)節(jié) nacl 溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)c將絲狀物溶解在2mol/l 的 nacl 溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色d用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料，其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同【答案】 b【解析】 dna在 0.14mol/l的 nacl 溶液中溶解度最低，dna存在于析出物中，不能去掉析出物，a錯(cuò)誤 ;利用

2、 dna在不同氯化鈉溶解中的溶解度不同，可以通過(guò)dna的反復(fù)溶解和析出除去雜質(zhì)，蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，而對(duì)dna沒(méi)有影響，因此可以利用木瓜蛋白酶除去雜蛋白，b 正確；用二苯胺試劑檢測(cè) dna分子的條件是水浴加熱， c錯(cuò)誤；植物細(xì)胞有細(xì)胞壁保護(hù)著，所以用菜花做實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，需要研磨，加入食鹽和洗滌劑， d 錯(cuò)誤2. 下圖所示為“dna的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的部分操作過(guò)程，有關(guān)分析錯(cuò)誤的是（）a圖中加入蒸懷水的目的相同b圖中向雞血細(xì)胞液內(nèi)加入少許嫩肉粉有助于去除雜質(zhì)c圖操作的目的是純化dna,去除溶于95%酒精中的雜質(zhì)d圖中2mol/lnacl 溶液能溶解黏稠物中的dna【答案】 a【解析】圖中加入蒸餾

3、水的目的是使得細(xì)胞吸水漲破，釋放核dna，中加入蒸懷水的目是析出dna，a 錯(cuò)誤；圖中向雞血細(xì)胞液內(nèi)加入少許嫩肉粉有助于去除雜質(zhì)， b 正確； dna不溶于酒精，所以圖操作的目的是純化 dna,去除溶于 95%酒精中的雜質(zhì)， c 正確； 2mol/lnacl 溶液中 dna的溶解度最高， d正確。1名校名 推薦3. 關(guān)于 dna粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)的操作及原理的敘述，正確的是（）a用蒸餾水使豬的紅細(xì)胞漲破獲取含dna的濾液b控制 nacl 溶液的濃度可以實(shí)現(xiàn)去除雜質(zhì)的目的c用玻璃棒輕緩攪拌濾液可使析出的dna量減少d利用 dna溶于乙醇的性質(zhì)進(jìn)一步純化dna【答案】 b【解析】 dna主要位于細(xì)胞

4、核，哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核，因此不能用來(lái)作為提取dna的材料， a 錯(cuò)誤；由于dna和蛋白質(zhì)等物質(zhì)在氯化鈉的溶解度不同，因此可以控制氯化鈉的濃度來(lái)去掉雜質(zhì)，用高鹽濃度的溶液溶解dna，能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì)，用低鹽濃度使dna析出，能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)，b 正確；用玻璃棒攪拌的目的是讓dna充分溶解， c 錯(cuò)誤； dna不溶于酒精，而其它雜質(zhì)溶解于酒精，故利用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精來(lái)純化dna， d錯(cuò)誤。4.dna 粗提取實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)盡可能避免dna斷裂和降解。相關(guān)操作正確的是（）a以菜花為材料進(jìn)行研磨時(shí)，可以適當(dāng)加熱以促進(jìn)dna溶解b向 dna溶液中迅速加入蒸餾水，使d

5、na快速析出c將絲狀物溶解到2 mol l-1 nacl 溶液中后，加水析出d向 dna溶液中加入冷卻的酒精并沿同一方向緩慢攪拌【答案】 d【解析】 dna耐 高 溫 ，因 此 適當(dāng)加熱不會(huì)促進(jìn)dna溶解， a 錯(cuò)誤；在0.14mol/lnacl溶 液 中 ，dna的 溶 解 度 最 低 ， 因 此 用 蒸 餾 水 將 nacl 溶 液 濃 度 調(diào) 至 0.14mol/l， 濾 去 濾 液 ， b 錯(cuò) 誤 ；dna絲 狀 物 溶 解 在 2 mol/lnacl溶 液 中 ， 加 95%的 冷 酒 精 析出， c 錯(cuò)誤； dna 不 溶 于 酒 精 ， 因此 可 用 體 積 分 數(shù) 為 95%冷

6、 酒 精 并沿同一方向緩慢攪拌析出 dna， d 正 確 。5. 下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)操作的敘述，不正確的是（）a鑒定蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)中，要先將雙縮脲試劑a、b 等量混勻后再加入待測(cè)樣液b綠葉色素分離實(shí)驗(yàn)中，要先加適量層析液再放劃好濾液細(xì)線(xiàn)的濾紙條c進(jìn)行 dna粗提取實(shí)驗(yàn)時(shí)，可使用新鮮的雞血細(xì)胞作為理想材料d在果酒制作的過(guò)程中，應(yīng)將裝置密封放在25左右的環(huán)境下【答案】 a【解析】 a、鑒定蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)中，要先加雙縮脲試劑a 液，形成堿性環(huán)境后再加b 液， a 錯(cuò)誤；b、綠葉色素分離實(shí)驗(yàn)中，要先加適量層析液，然后往層析液中放入劃好濾液細(xì)線(xiàn)的濾紙條，b 正確；2名校名 推薦c、進(jìn)行 dna粗提取實(shí)驗(yàn)時(shí)，可使用新鮮

7、的雞血細(xì)胞作為理想材料，c 正確；d、在腐乳制作的毛霉生長(zhǎng)階段，應(yīng)將豆腐塊整齊排放并留有一定空隙，給毛霉生長(zhǎng)的空間，d正確6. 對(duì)利用新鮮的菜花進(jìn)行“dna 粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)，有關(guān)說(shuō)法正確的是（）a向菜花組織中加入蒸餾水并攪拌即可釋放核dnab加入洗滌劑的作用是瓦解細(xì)胞膜并溶解dnac利用 dna在不同濃度nacl 中溶解度不同，可粗提取dnad含 dna的氯化鈉溶液與二苯胺在常溫下混合呈藍(lán)色【答案】 c【解析】菜 花細(xì) 胞 為 植 物 細(xì) 胞 ， 有 細(xì) 胞 壁 保 護(hù) ， 因 此 加 蒸 餾 水 不 會(huì) 吸 水 脹 破 ， a 錯(cuò) 誤 ；加 入 洗 滌 劑 的 作 用 是 瓦 解 細(xì) 胞

8、 膜 ，但 不 能 溶 解 dna， b 錯(cuò) 誤 ；利 用 dna 在 不 同 濃 度 nacl 中溶 解 度 不 同 可 粗 提 取 dna， c 正 確 ；含 dna 的 氯 化 鈉 溶 液 與 二 苯 胺 在 沸 水 浴 下 混 合 呈 藍(lán) 色 ，d 錯(cuò) 誤 。7. 下列對(duì)“ dna的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)原理的敘述，正確的是（）a利用 dna能溶于酒精溶液，而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液，可將dna與蛋白質(zhì)分離b利用 85的高溫能使蛋白質(zhì)變性，卻對(duì)dna沒(méi)有影響的特性，將 dna與蛋白質(zhì)分離 1dna與雜質(zhì)分離c利用 dna在 0. 14moll nacl 溶液中溶解度最大的特點(diǎn)，可將d在 dna

9、濾液中加入嫩肉粉，通過(guò)木瓜蛋白酶的作用，可將dna與蛋白質(zhì)分離【答案】 d【解析】利用 dna不能溶于酒精溶液，而某些蛋白質(zhì)能溶于酒精溶液，利用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精可將 dna與蛋白質(zhì)分離， a 錯(cuò)誤；高溫對(duì)蛋白質(zhì)和dna都有影響， 只是 dna對(duì)高溫的耐受性強(qiáng)于蛋白質(zhì)，-1dna與雜質(zhì)分離， c錯(cuò)誤；利用b 錯(cuò)誤；利用 dna在 0.14mol ?l nacl 溶液中溶解度最小的特點(diǎn)，可將酶的專(zhuān)一性，蛋白酶只能將蛋白質(zhì)分解，而不能分解dna，在 dna濾液中加入嫩肉粉，通過(guò)木瓜蛋白酶的作用，可將 dna與蛋白質(zhì)分離， d 正確。8. 某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行 dna 粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)，操作錯(cuò)誤的的

10、是（）a. 加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨b. 用蛋白酶純化過(guò)濾后的研磨液中的dnac. 加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌d. 加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱【答案】 a3名校名 推薦【解析】加入洗滌劑后研磨動(dòng)作要輕緩、柔和，否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟的操作， a 錯(cuò)誤；利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的dna與蛋白質(zhì)分開(kāi)，起到純化的作用，b 正確；加入酒精溶液，靜置溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的dna，用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪拌，防止斷裂， c 正確；用二苯胺鑒定dna需要水浴加熱，d正確。9. 下列關(guān) 于生物技術(shù)實(shí)踐的敘述中，正確的是（）a. 用移液管稀釋菌液時(shí)，吹吸三次的

11、目的是使菌液與水充分混勻b. 參與制作果酒、果醋和腐乳的菌種中只有毛霉是真核生物c. 海藻酸鈾溶液濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致制作的凝膠珠顏色過(guò)淺呈白色d. 用花菜提取 dna 時(shí)加入食鹽和洗滌劑的目的分別是充分研磨和瓦解細(xì)胞膜【答案】 a【解析】用移液管稀釋菌液時(shí)，吹吸三次的目的是使菌液與水充分混勻，故a 正確。果酒與酵母菌相關(guān)，果醋和醋酸菌相關(guān)，腐乳與多種霉菌相關(guān)，只有醋酸菌是原核生物，其他是真核生物，故b錯(cuò)。海藻酸鈉溶液濃度過(guò)低會(huì)導(dǎo)致制作的凝膠珠顏色過(guò)淺呈白色，固定的酵母細(xì)胞少，故c錯(cuò)。用花菜提取 dna 時(shí)加入食鹽和洗滌劑的目的分別是溶解dna和瓦解細(xì)胞膜，故 d 錯(cuò)。10. 下表是關(guān)于 dna粗提

12、取與鑒定實(shí)驗(yàn)中所使用的材料、操作及其作用的表述，正確的是（）試劑操作作用a檸檬酸鈉溶液與雞血混合防止血液凝固b蒸餾水與雞血細(xì)胞混合保持細(xì)胞形狀c蒸餾水加入到溶解有dna的 nacl 中加速 dna的溶解d冷卻的酒精加入到過(guò)濾后dna的 nacl 中產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)【答案】 a【解析】檸檬酸鈉溶液是抗凝劑，與雞血混合后可防止血液凝固，a 正確；第一次使用蒸餾水是讓蒸餾水與雞血細(xì)胞混合，作用是讓血細(xì)胞吸水膨脹，加速血細(xì)胞破裂，b 錯(cuò)誤；第二次使用蒸餾水是將蒸餾水加入到溶解有dna的 2mol/l 的 nacl 溶液中，作用是使nacl 溶液的濃度降低至0.14 mol/l ，此時(shí) dna在 na

13、cl 溶液中的溶解度最小，從而使dna析出， c 錯(cuò)誤； dna不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精。利用這一原理，可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的dna， d 錯(cuò)誤。二、非選擇題（30 分，每格2 分）11. （ 16 分）某實(shí)驗(yàn)小組以洋蔥組織為實(shí)驗(yàn)材料，進(jìn)行 dna粗提取和鑒定的實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)主要過(guò)程如下圖，回答下列問(wèn)題：4名校名 推薦（ 1）步驟一中需加入一定量的洗滌劑和對(duì)洋蔥組織進(jìn)行處理，加入前者是為了瓦解細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，加入后者的目的是_。將攪拌和研磨后的物質(zhì)進(jìn)行過(guò)濾，即可得到含有dna的濾液。（ 2）步驟二是dna純化過(guò)程中的關(guān)鍵步驟，可以采用以下幾種不同的方法：濾液中nacl

14、濃度在 0.14 mol l 時(shí)可分離出dna，若要再次提純，需要將其溶解在mol l 的 nacl 溶液中；通常會(huì)向dna粗提取物中加入嫩肉粉，其目的是_；將得到的dna粗提取物放在60 75水浴中保溫10 15 min ，蛋白質(zhì)被破壞，但仍能得到純度較高的 dna，說(shuō)明了dna.（ 3）步驟三中向?yàn)V液中加入dna體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精的目的是_，依據(jù)的原理是。得到純凈的dna后，可利用dna與在沸水浴條件下發(fā)生顯色反應(yīng)，來(lái)對(duì)其進(jìn)行鑒定?！敬鸢浮浚?1）食鹽（氯化鈉）溶解 dna（ 2） 2破壞其中的蛋白質(zhì)具有較高的穩(wěn)定性（或耐較高溫度） （ 3）析出 dnadna 不溶于酒精，但酒精可以使

15、蛋白質(zhì)變性并與dna分離二苯胺【解析】（ 1） 進(jìn)行 dna粗提取和鑒定時(shí)，步驟一中需加入一定量的洗滌劑和食鹽（氯化鈉）對(duì)洋蔥組織進(jìn)行處理，加入前者是為了瓦解細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，加入后者的目的是溶解dna，將攪拌和研磨后的物質(zhì)進(jìn)行過(guò)濾，即可得到含有dna的濾液。（ 2）步驟二是dna純化過(guò)程中的關(guān)鍵步驟，可以采用以下幾種不同的方法：利用 dna在濃度為0.14 mol l 的 nacl 溶液中溶解度最低可分離出dna；若要再次提純，需要將其溶解在2mol l 的 nacl 溶液中。通常會(huì)向dna粗提取物中加入嫩肉粉，由于嫩肉粉中含有蛋白酶，可破壞其中的蛋白質(zhì)。由于 dna具有較高的穩(wěn)定性（或耐較高溫度

16、） ，將得到的dna粗提取物放在60 75水浴中保溫10 15 min ，則蛋白質(zhì)被破壞，可得到純度較高的dna。（ 3）由于 dna不溶于酒精， 但酒精可以使蛋白質(zhì)變性并與dna分離，故步驟三中向?yàn)V液中加入dna體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精的目的是析出dna。得到純凈的dna后，可利用dna與二苯胺在沸水浴條件下發(fā)生顯色（藍(lán)色）反應(yīng)，來(lái)對(duì)其進(jìn)行鑒定。12. （ 14 分）真核生物細(xì)胞內(nèi)，大量 dna和蛋白質(zhì)以及一些 rna等混雜在一起，難以分離。生物興趣小組的同學(xué)為了獲得純度相對(duì)較高的dna展開(kāi)了實(shí)驗(yàn)探究。（ 1）分離各種物質(zhì)的基本思路是根據(jù)dna和其他物質(zhì)理化性質(zhì)的不同而采取一定的方法，如圖是從

17、各種物質(zhì)之間的差異角度開(kāi)展研究：5名校名 推薦a、取雞血細(xì)胞懸液10ml，加蒸餾水20ml，同時(shí)用玻璃棒（填“輕輕攪拌”或填“快速攪拌”）。過(guò)濾，取濾液，轉(zhuǎn)移到塑料材質(zhì)的大燒杯中。b、沿大燒杯內(nèi)壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸銨溶液，用玻棒沿一個(gè)方向（填“輕輕攪拌”或填“快速攪拌”），同時(shí)不斷收集析出的物質(zhì)。下圖是根據(jù)雞血中幾種物質(zhì)的析出情況繪制的曲線(xiàn)，請(qǐng)據(jù)圖分析：c、如果只要收集纖維蛋白，可采取的措施有。d、先用飽和度40%的硫酸銨溶液析出絕大部分纖維蛋白和大部分球蛋白，再在飽和度約為的硫酸銨溶液中析出dna（既保證dna提取量較大又避免其他雜質(zhì)過(guò)多）。（ 2）如果要進(jìn)一步去掉其他雜質(zhì)，盡可能提高

18、獲得的dna純度，可采取的兩種辦法有：將 dna與球蛋白的混合物加入到中，收集再次析出物；用處理溶有 dna與蛋白質(zhì)的溶液。【答案】（1）溶解度a、快速攪拌b、輕輕攪拌c 、在硫酸銨濃度達(dá)到30%之前收集析出物d、 50%球蛋白（ 2）冷卻酒精嫩肉粉（木瓜蛋白酶）【解析】（ 1 ）分 析 曲 線(xiàn)圖 可 知 ，不 同 物 質(zhì) 在 不 同 濃 度 的硫 酸 銨 中 的 析 出 的 相 對(duì) 量 有 所 差別 ， 即 分 離 各 種 物 質(zhì) 的 基 本 思 路 是 根 據(jù) dna 和 其 他 物 質(zhì) 之 間 溶 解 度 的 差 異 角 度 開(kāi) 展 研 究 ：a、取 雞 血 細(xì) 胞 懸 液 loml ，加 蒸 餾 水 20ml ，此 時(shí) 可以 用 玻 璃 棒 快 速 攪 拌 ，以 加 速 血 細(xì)胞 的 破 裂 。b、沿 大 燒 杯 內(nèi) 壁 持 續(xù) 、緩 慢 地 加 入 飽 和 硫 酸 銨 溶 液 ，為 了 防 止 將 dna 的 絮 狀 物 攪 碎 ，此 時(shí) 應(yīng) 用 玻 棒 沿 一 個(gè) 方 向 輕 輕 攪 拌 ， 同 時(shí) 不 斷 收 集 析 出 的 物 質(zhì) 。c、 圖 中 看 出 ， 纖 維 蛋 白 的 溶 解 度 最 低 ， 硫 酸 銨 濃 度 在 20%之 前 已 經(jīng) 開(kāi) 始 析 出 ， 說(shuō) 明溶 解 度 開(kāi) 始