糖精鈉含量的測定（液相色譜法）

技能點(diǎn)：標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的配制二糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)中間溶液的配制三糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制四目錄儀器準(zhǔn)備一儀器準(zhǔn)備一儀器規(guī)格儀器規(guī)格常壓烘箱容量瓶10mL、50mL、100mL干燥器刻度移液管1mL、5mL、10mL電子天平0.0001g燒杯100mL冰箱0℃~5℃玻璃棒移液槍洗瓶糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的配（1000mg/L）1.稱量2.溶解3.定容4.貯存二1.稱量糖精鈉含量的測定準(zhǔn)確稱取糖精鈉0.117g（精確到0.0001g）。糖精鈉稱量前需在120℃烘4h，去除結(jié)晶水，干燥器中冷卻至室溫。2.溶解糖精鈉含量的測定糖精鈉0.117g（精確到0.0001g）用少量水（GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水）溶解，攪拌均勻，分多次洗進(jìn)100mL容量瓶中。一級(jí)水3.定容糖精鈉含量的測定定容至100mL一級(jí)水用水（GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水）溶解并定容至100mL。4.貯存糖精鈉含量的測定定容至100mL后轉(zhuǎn)移至試劑瓶中，糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1000mg/L）4℃糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液（1000mg/L）糖精鈉儲(chǔ)備液4℃貯存，保存期為6個(gè)月。糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)中間溶液的配制（200mg/L）三準(zhǔn)確吸取糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液10.0mL于50mL容量瓶中，用水定容。4℃定容至50mL貯備液糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)中間液（200mg/L）吸取10mL中間液4℃貯存，保存期為3個(gè)月。糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液的配制四1.00mg/L5.00mg/L20.0mg/L100mg/L0mg/L10.0mg/L50.0mg/L200mg/L準(zhǔn)確吸取糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)中間溶液0mL、0.05mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL、10.0mL，用水定容至10mL。臨用現(xiàn)配。糖精鈉含量的測定（液相色譜法）

技能點(diǎn)：測定原理與試劑配制測定原理一適用范圍二試劑配制三目錄測定原理樣品經(jīng)水提取，高脂肪樣品經(jīng)正己烷脫脂，高蛋白樣品經(jīng)蛋白沉淀劑沉淀蛋白，采用液相色譜分離.紫外檢測器檢測，外標(biāo)法定量。一適用范圍1.本法適用于食品中糖精鈉的測定。2.測定依據(jù)：GB5009.28-2016第一法（液相色譜法）二試劑配制1.試劑2.儀器準(zhǔn)備3.試劑配制4.標(biāo)準(zhǔn)品三（1）氨水（NH3·H2O）。（2）亞鐵氰化鉀[K4Fe(CN)6·3H2O]。（3）乙酸鋅[Zn(CH3COO)2·2H2O]。（4）無水乙醇（CH3CH2OH）。（5）正己烷（C6H14）。1.試劑（除另有說明，所用試劑均為分析純）糖精鈉含量的測定（6）甲醇（CH3OH）：色譜純。（7）乙酸銨（CH3COONH4）:色譜純。（8）甲酸（HCOOH）：色譜純。（9）水：GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。（10）冰乙酸（CH3COOH）。儀器規(guī)格儀器規(guī)格電子天平0.001g量筒100mL移液槍洗瓶塑料離心管50mL試管水性微孔濾膜0.22μm燒杯250mL容量瓶1000mL玻璃棒刻度移液管1mL試劑瓶2.儀器準(zhǔn)備糖精鈉含量的測定（1）氨水溶液（1+99）：取1mL氨水，加到99mL水中，混勻。3.試劑配制：氨水溶液糖精鈉含量的測定99mL水1mL氨水氨水溶液（1＋99）（2）亞鐵氰化鉀溶液（106g/L）：稱取106g亞鐵氰化鉀，加入適量水溶解，用水定容至1000mL。3.試劑配制：亞鐵氰化鉀溶液糖精鈉含量的測定一級(jí)水106g亞鐵氰化鉀106g亞鐵氰化鉀一級(jí)水定容至1000mL亞鐵氰化鉀溶液（106g/L）（3）乙酸鋅溶液（220g/L）：稱取220g乙酸鋅溶于少量水中，加入30mL冰乙酸，用水定容至1000mL。3.試劑配制:乙酸鋅溶液糖精鈉含量的測定一級(jí)水220g乙酸鋅一級(jí)水定容至1000mL乙酸鋅溶液（220g/L）30mL冰乙酸（4）甲酸－乙酸銨溶液（2mmol/L甲酸+20mmol/L乙酸銨）：稱取1.54g乙酸銨，加入適量水溶解，再加入75.2μL甲酸，用水定容至1000mL，經(jīng)0.22μm水相微孔濾膜過濾后備用。3.試劑配制：甲酸-乙酸銨溶液糖精鈉含量的測定一級(jí)水1.54g乙酸銨75.2μL甲酸一級(jí)水定容至1000mL甲酸—乙酸鋅溶液0.22μm水相微孔濾膜過濾糖精鈉（C6H4CONNaSO2，CAS號(hào)：128-44-9），純度≥99%，或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。4.標(biāo)準(zhǔn)品糖精鈉含量的測定糖精鈉含量的測定（液相色譜法）

技能點(diǎn)：試樣溶液的測定試樣制備二試樣提取三儀器參考條件四標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作五試樣溶液的測定六目錄儀器準(zhǔn)備一儀器準(zhǔn)備一儀器規(guī)格儀器規(guī)格高效液相色譜儀超聲波清洗儀35kHz電子天平0.001g離心機(jī)≥10000r/min恒溫水浴鍋100℃±1℃渦旋振蕩器水性微孔濾膜0.22μm具塞離心管50mL容量瓶50mL刻度移液管1mL、2mL研磨機(jī)勻漿機(jī)試樣制備二試樣提取1.一般性試樣2.含膠基的果凍、糖果等試樣3.油脂、巧克力、奶油、油炸食品等高油脂試樣三1.一般性試樣糖精鈉含量的測定定容至50mL準(zhǔn)確稱取2g（0.001g）50mL具塞離心管加水25mL50℃水浴超聲20min冷卻至室溫加亞鐵氰化鉀溶液2mL8000r/min離心5min水相轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶殘?jiān)屑铀?0mL渦旋混勻渦旋混勻超聲5min8000r/min離心5min待液相色譜測定50mL容量瓶適量上清液過0.22μm濾膜水相轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶2.含膠基的果凍、糖果等試樣糖精鈉含量的測定定容至50mL準(zhǔn)確稱取2g（0.001g）50mL具塞離心管加水25mL50℃超聲20min冷卻至室溫加亞鐵氰化鉀溶液2mL8000r/min離心5min水相轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶殘?jiān)屑铀?0mL渦旋混勻渦旋混勻超聲5min8000r/min離心5min待液相色譜測定70℃水浴加熱溶解試樣50mL容量瓶適量上清液過0.22μm濾膜水相轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶3.油脂、巧克力、奶油、油炸食品等高油脂試樣糖精鈉含量的測定定容至50mL準(zhǔn)確稱取2g（0.001g）50mL具塞離心管50℃超聲20min冷卻至室溫加亞鐵氰化鉀溶液2mL、乙酸鋅溶液2mL8000r/min離心5min殘?jiān)屑铀?0mL渦旋混勻渦旋混勻超聲5min8000r/min離心5min待液相色譜測定60℃水浴加熱約5min，不時(shí)振搖溶解脂肪棄去有機(jī)相水相轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶50mL容量瓶適量上清液過0.22μm濾膜水相轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶加氨水溶液25mL、乙醇1mL正己烷10mL儀器參考條件色譜柱：C18柱，4.6mm×250mm，5μm，或等效色譜柱。流動(dòng)相：甲醇＋乙酸銨溶液=5＋95。流速：1mL/min。檢測波長：230nm。進(jìn)樣量：10

μL。四標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作將糖精鈉（以糖精計(jì)）標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液注入液相色譜儀中，測定相應(yīng)的峰面積，以糖精鈉（以糖精計(jì)）標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。五試樣溶液的測定將試樣溶液注入液相色譜儀中，得到峰面積，根據(jù)