枳實(shí)揮發(fā)性成分檸檬烯的含量測定及質(zhì)量研究枳實(shí)揮發(fā)性成分檸檬烯的含量測定及質(zhì)量研究[摘要]目的：建立枳實(shí)揮發(fā)性成分檸檬烯的含量測定方法并根據(jù)檸檬烯的含量初步推斷枳實(shí)藥材炮制品的炮制程度。方法：以市場收集的合格枳實(shí)藥材為原料，以自制或委托加工的形式，嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的炮制方法加工，制備炮制飲片。采用加熱回流提取法提取，氣相色譜法測定枳實(shí)飲片中揮發(fā)性成分檸檬烯的含量，并擬用檸檬烯的測定結(jié)果作為枳實(shí)飲片炮制程度的初步判斷依據(jù)。結(jié)果：檸檬烯在0.001~4.806mgml-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（R2=0.9999），平均加樣回收率為105.77%。結(jié)論：本含量測定方法準(zhǔn)確、靈敏、簡便，具有良好的重復(fù)性和回收率，可用于枳實(shí)揮發(fā)性物質(zhì)檸檬烯的含量測定。通過該方法所測得的結(jié)果顯示在不同炮制品中檸檬烯含量與枳實(shí)生品相比均有不同程度的降低，認(rèn)為可作為其品質(zhì)控制的指標(biāo)之一，用以評(píng)價(jià)枳實(shí)飲片炮制程度及其質(zhì)量。[關(guān)鍵詞]枳實(shí)；揮發(fā)性成分；檸檬烯；氣相色譜法；含量測定

DeterminationandqualitystudyofvolatilecomponentlimonenefromAurantiiFructusImmaturus[Abstract]Objective:ToestablishamethodforthedeterminationofvolatilecomponentlimoneneinAurantiiFructusImmaturusandtoinfertheprocessingdegreeofAurantiiFructusImmaturusaccordingtothecontentoflimonene.Methods:TakingthequalifiedAurantiiFructusImmaturuscollectedfromthemarketasrawmaterial,theprocessedpieceswerepreparedintheformofself-madeorcommissionedprocessing,strictlyaccordingtotheprocessingmethodstipulatedinthestandard.ThecontentofvolatilecomponentlimoneneinAurantiiFructusImmaturuswasextractedbyheatingrefluxextractionanddeterminedbygaschromatography.ThedeterminationresultsofvolatilecomponentlimonenewereusedasthepreliminarybasisforjudgingtheprocessingdegreeofAurantiiFructusImmaturus.Results:Thecalibrationcurveofvolatilecomponentlimonenewaslinearintherangeof0.001~4.806mgml-1(R2≤0.9999).Theaveragerecoveryoflimonenewas105.77percent.Conclusion:Themethodisaccurate,sensitive,simple,reproducibleandreproducible,andcanbeusedforthedeterminationofvolatilecomponentlimoneneinAurantiiFructusImmaturus.TheresultsshowedthatthecontentofvolatilecomponentlimoneneindifferentprocessedproductswaslowerthanthatinAurantiiFructusImmaturus,whichcouldbeusedasoneoftheindexesofqualitycontroltoevaluatetheprocessingdegreeandqualityofAurantiiFructusImmaturus.[Keywords]AurantiiFructusImmaturus;volatilecomponents;limonene;gaschromatography;contentdetermination

目錄引言 51材料 81.1儀器 81.2樣品及試劑 81.2.1樣品信息 81.2.2試劑 92樣品前處理方法考察 92.1提取溶劑考察 92.2提取溶劑量考察 92.3提取方法考察 102.3.1超聲提取法 102.3.2回流提取法 102.4提取時(shí)間考察 102.5樣品前處理方法確定 113色譜條件考察 113.1色譜柱考察 113.2色譜條件確定 114方法學(xué)驗(yàn)證及含量測定 124.1溶液的制備 124.1.1對(duì)照品溶液的制備 124.1.2供試品溶液的制備 134.2線性關(guān)系考察 134.3精密度試驗(yàn) 144.4重復(fù)性試驗(yàn) 144.5穩(wěn)定性試驗(yàn) 144.6回收率試驗(yàn) 154.7樣品含量測定 155結(jié)果與討論 16結(jié)論 18參考文獻(xiàn) 19致謝 錯(cuò)誤!未定義書簽。引言枳實(shí)為蕓香科植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培變種或甜橙CitrussinensisOsbeck的干燥幼果[1]，5～6月收集自落的果實(shí)，除去雜質(zhì)，自中部橫切為兩半，曬干或低溫干燥，較小者直接曬干或低溫干燥。其藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《中國藥典》2015年版一部。枳實(shí)味苦、辛、酸，性微寒，歸脾、胃經(jīng)，在中醫(yī)臨床上運(yùn)用為理氣藥，功能破氣消積，化痰散痞，用于積滯內(nèi)停，痞滿脹痛，瀉痢后重，大便不通，痰滯氣阻，胸痹，結(jié)胸，臟器下垂等癥[2-3]。作為常用藥材，枳實(shí)應(yīng)用歷史悠久，最早在《神農(nóng)本草經(jīng)》中列為中品收載[4]。中藥炮制是一門由我國歷代中醫(yī)藥士在醫(yī)療實(shí)踐中不斷積累經(jīng)驗(yàn)而發(fā)展至今的制藥學(xué)問，是中醫(yī)藥學(xué)的一大特色。枳實(shí)作為常用中藥但其生品破氣作用強(qiáng)烈，在臨床應(yīng)用中，鮮少直接使用生品入藥，一般根據(jù)需要選擇相應(yīng)的炮制品入藥。枳實(shí)藥材炮制方法多樣，據(jù)考證，歷代有麩炒、土炒、姜炙、酒炙等多種炮制方法用以緩和藥效，提高療效，近現(xiàn)代炮制方法主要有去穰、切片、炒黃、炒炭、蜜炙、砂燙、麩炒、蒸制、面炒等[5-6]，而《中國藥典》2015年版中僅收載了“凈制”、“麩炒”兩種炮制方法。《廣東省中藥炮制規(guī)范》1984年版也收載了枳實(shí)的飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定了3種炮制方法：枳實(shí)、麩炒枳實(shí)、面炒枳實(shí)。其中，由于《廣東省中藥炮制規(guī)范》1984年版收載的枳實(shí)飲片“枳實(shí)”，與《中國藥典》2015年版一部收載的枳實(shí)飲片“枳實(shí)”名稱相同，但炮制方法不同，前者為“蒸制”，后者為“凈制”，而枳實(shí)“蒸制”的方法是嶺南常用的中藥飲片炮制方法[7]，在廣東有悠久的應(yīng)用基礎(chǔ)，醫(yī)生在開具處方時(shí)，根據(jù)廣東人的體質(zhì)，喜歡用蒸制過枳實(shí)入處方調(diào)劑，標(biāo)示名稱為“熟枳實(shí)”或“制枳實(shí)”。枳實(shí)資源豐富，廉價(jià)易得，作為常見中藥，其流通領(lǐng)域廣泛，在臨床處方中常常根據(jù)需要選擇枳實(shí)藥材飲片，其中常用的枳實(shí)藥材飲片有枳實(shí)凈制飲片、麩炒枳實(shí)飲片和制枳實(shí)飲片。枳實(shí)藥材中所含成分復(fù)雜，含豐富的生物活性成份且發(fā)揮不同的藥理作用。近年來隨著學(xué)者們對(duì)枳實(shí)的研究逐漸深入[8]，枳實(shí)中的主要的化學(xué)成分被陸續(xù)發(fā)現(xiàn)并分離，有效成分及藥理作用逐步明確?；谀壳把芯克剑汛_定枳實(shí)有效成分有：橙皮苷、新橙皮苷等黃酮類化合物，其藥理作用為抑制平滑肌收縮、消炎止痛、抗氧化、抗癌[9-14]；檸檬烯和α-松油醇等[15-16]揮發(fā)性成分，其藥理作用為理氣、抗菌、抗?jié)儭㈡?zhèn)痛、中樞抑制作用[17-18]；辛弗林和N-甲基辛弗林[19]等生物堿類化合物，其藥理作用為強(qiáng)心、升壓、抗休克[20-21]。枳實(shí)具有破氣消積，化痰散痞的功效，用于治療積滯內(nèi)停，化痰散痞的作用，在我省臨床用量較大。枳實(shí)揮發(fā)性成分是枳實(shí)香氣的主要來源，也是其主要有效成分之一。文獻(xiàn)表明，枳實(shí)中的揮發(fā)性成分，對(duì)人體有腸道平滑肌有強(qiáng)刺激性，生枳實(shí)飲片含有較高的揮發(fā)性成分，直接應(yīng)用于臨床處方中極易造成胃腸功能的紊亂，經(jīng)麩炒炮制后，揮發(fā)性物質(zhì)的含量有所降低[22-23]，起到“去燥性而和胃”的作用，因此，廣東的醫(yī)生在臨床調(diào)劑時(shí)，習(xí)慣在處方中根據(jù)臨床診斷結(jié)合病人體質(zhì)選用合適的枳實(shí)藥材炮制飲片以降低枳實(shí)藥材的“烈性”。近年來龔千鋒[24-28]等眾多學(xué)者通過運(yùn)用氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行深入的研究，發(fā)現(xiàn)并證實(shí)檸檬烯為枳實(shí)主要揮發(fā)性成分且具有鎮(zhèn)靜中樞神經(jīng)、抑制胃食管反流和促進(jìn)胃腸健康蠕動(dòng)、溶解膽結(jié)石、緩解心絞痛、抗菌等作用，將在醫(yī)藥領(lǐng)域中創(chuàng)造巨大的價(jià)值。我國枳實(shí)種質(zhì)資源復(fù)雜，以“鵝眼枳實(shí)”為佳，不同地區(qū)采收時(shí)間各異。同一品種因產(chǎn)地不同，生長的氣候、環(huán)境、土壤不同，對(duì)枳實(shí)的品質(zhì)可能存在差異，另外，同一藥材飲片采用不同的炮制方法以及炮制的程度對(duì)其有效成分的含量均具有一定的影響[29]。由于藥材的藥性與其有效成分的種類與含量緊密關(guān)聯(lián)，現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)研究主要集中在對(duì)枳實(shí)中含有的主要揮發(fā)性成分、黃酮苷、生物堿等進(jìn)行定量分析，而枳實(shí)歷代炮制方法記載較多，炮制工藝不穩(wěn)定[30]，不同炮制品的內(nèi)在質(zhì)量有明顯差異。歷版《中國藥典》收載的枳實(shí)藥材飲片的含量測定僅以生物堿類化合物辛弗林的含量作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，僅以單一成分為指標(biāo)并不能較好的反映枳實(shí)藥材飲片的品質(zhì)，其它類成分的含量對(duì)該藥材均具有一定的質(zhì)量控制意義。由于炮制工藝的不同,使得炮制后主要揮發(fā)性成分檸檬烯含量呈規(guī)律性的降低趨勢(shì)[31]，因此能夠以枳實(shí)主要揮發(fā)性成分檸檬烯含量作為另一質(zhì)量控制指標(biāo)，與辛弗林的含量測定互為補(bǔ)充，增強(qiáng)質(zhì)量控制的嚴(yán)謹(jǐn)性和科學(xué)性，同時(shí)可以根據(jù)檸檬烯的降低程度初步評(píng)價(jià)其炮制飲片的炮制程度。本實(shí)驗(yàn)以市場收集的合格枳實(shí)藥材為原料，以自制或委托加工的形式，嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的炮制方法加工，制備炮制飲片。采用加熱回流提取法提取，氣相色譜法測定枳實(shí)飲片中揮發(fā)性成分檸檬烯的含量，建立枳實(shí)揮發(fā)性成分檸檬烯的含量測定標(biāo)準(zhǔn)，作為其品質(zhì)控制的指標(biāo)之一，并擬用檸檬烯的測定結(jié)果作為枳實(shí)飲片炮制程度的初步判斷依據(jù)。在日后的的質(zhì)量評(píng)價(jià)中，可為枳實(shí)藥材及不同炮制品在醫(yī)藥、保健、食品等領(lǐng)域的進(jìn)一步應(yīng)用提供質(zhì)量控制依據(jù)。

1材料1.1儀器氣相色譜儀：島津GC-20301.2樣品及試劑1.2.1樣品信息本次實(shí)驗(yàn)從市場收集合格的中藥材為原料，以自制或委托加工的形式，嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的炮制方法加工，制備炮制飲片。以炮制飲片為參照物，對(duì)市場流通的枳實(shí)飲片進(jìn)行比對(duì)。本次研究樣品包括自制樣品和市場流通的樣品，樣品詳細(xì)信息見表1。表1枳實(shí)樣品信息表編號(hào)名稱炮制方法生產(chǎn)單位銷售單位1枳實(shí)凈制康美康美2制枳實(shí)發(fā)酵后蒸制自制/3麩炒枳實(shí)麩炒自制/4制枳實(shí)發(fā)酵后蒸制至信至信5麩炒枳實(shí)麩炒至信至信6麩炒枳實(shí)麩炒廣東和翔二天堂藥店7枳實(shí)凈制切制/真和堂藥店8枳實(shí)凈制切制/佛山仁參緣9枳實(shí)凈制切制黃岡金貴湛江益民大藥房10麩炒枳實(shí)麩炒安徽匯中州韶關(guān)鄉(xiāng)親大藥房11麩炒枳實(shí)麩炒/江門大參林1.2.2試劑檸檬烯對(duì)照品（批號(hào)：100470-201302，含量96.0%，購于中國食品藥品檢定研究院）；水為純化水；其他試劑均為分析純。2樣品前處理方法考察2.1提取溶劑考察本實(shí)驗(yàn)考察了分別使用正己烷、乙酸乙酯為溶劑進(jìn)行超聲提取，對(duì)揮發(fā)性成分檸檬烯進(jìn)行含量測定。測定結(jié)果（見表2）顯示二者提取能力相當(dāng)。考慮試劑的毒性對(duì)操作人員人身安全的影響，選擇以乙酸乙酯為提取溶劑。表2提取溶劑考察結(jié)果編號(hào)品種名稱提取溶劑含量%2制枳實(shí)正己烷0.03乙酸乙酯0.032.2提取溶劑量考察本實(shí)驗(yàn)考察了體積為10ml、25ml、50ml乙酸乙酯作為溶劑進(jìn)行超聲提取，對(duì)揮發(fā)性成分檸檬烯進(jìn)行含量測定。測定結(jié)果（見表3）表明提取程度相當(dāng)，考慮溶劑體積合理性，選擇提取體積為25ml。表3提取溶劑考察結(jié)果編號(hào)品種名稱提取體積/ml含量%2制枳實(shí)100.04250.04500.042.3提取方法考察2.3.1超聲提取法取供試品適量，粉碎過四號(hào)篩，取約2.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，密塞，稱定重量，超聲提取30min，再稱定重量，用乙酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。2.3.2回流提取法取供試品適量，粉碎過四號(hào)篩，取約2.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，密塞，稱定重量，加熱回流30min，放冷，再稱定重量，用乙酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。將上述制備得供試品溶液各精密吸取1μl，對(duì)揮發(fā)性成分檸檬烯進(jìn)行含量測定。測定結(jié)果（見表4）顯示回流提取法提取揮發(fā)油中檸檬烯得率高于超聲提取法，綜合考慮提取方法的操作簡便性和提取效率，選擇回流法提取揮發(fā)油。表4提取方法考察結(jié)果編號(hào)品種名稱提取方法含量%2制枳實(shí)超聲提取法0.04回流提取法0.052.4提取時(shí)間考察本實(shí)驗(yàn)考察了乙酸乙酯作為溶劑分別提取30min，60min，結(jié)果（見表5）表明30min已提取完全，故確定提取時(shí)間為30min。表5提取時(shí)間考察結(jié)果編號(hào)品種名稱提取時(shí)間/min平均含量%2制枳實(shí)300.05600.052.5樣品前處理方法確定綜合上述考察，確定本實(shí)驗(yàn)供試品前處理方法為：取供試品適量，粉碎過四號(hào)篩，取約2.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，密塞，稱定重量，加熱回流30min，放冷，再稱定重量，用乙酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。3色譜條件考察3.1色譜柱考察本實(shí)驗(yàn)以檸檬烯的含量作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用氣相色譜法建立其含量的測定方法，參考文獻(xiàn)色譜條件，對(duì)柱溫的升溫程序（進(jìn)樣口溫度、載氣流速、分流比等）進(jìn)行了優(yōu)化，并考察了不同聚二甲基硅氧烷毛細(xì)管柱DP-1、RTX-1之間的差異，結(jié)果（見表6）基本一致。表6提取溶劑考察結(jié)果編號(hào)品種名稱色譜柱平均含量%2制枳實(shí)DP-10.06RTX-10.063.2色譜條件確定色譜柱：聚二甲基硅氧烷(DB-1)毛細(xì)管柱（柱長為30m，內(nèi)徑為0.25mm，膜厚度0.25μm）；檢測器溫度為310℃(FID)；進(jìn)樣口溫度為200℃；載氣：N2；柱流速：1.0ml/min；分流比：30:1；柱溫箱程序升溫初始溫度70℃，2℃/min升溫至150℃，然后20℃/min升溫至280℃，保持直至分析完成。色譜圖見圖1~2。AAA:檸檬烯圖1對(duì)照品圖譜AAA:檸檬烯圖2供試品圖譜4方法學(xué)驗(yàn)證及含量測定4.1溶液的制備4.1.1對(duì)照品溶液的制備取檸檬烯對(duì)照品適量，精密稱定，加入乙酸乙酯制成每1ml含0.1g的溶液，即得。4.1.2供試品溶液的制備取供試品適量，粉碎過四號(hào)篩，取約2.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，密塞，稱定重量，加熱回流30min，放冷，再稱定重量，用乙酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。4.2線性關(guān)系考察精密稱取檸檬烯對(duì)照品，加乙酸乙酯配制成0.001，0.012，0.120，1.200，2.403，4.806mgml-1的系列對(duì)照品溶液，精密吸取上述對(duì)照品溶液各1μl，分別按上述色譜條件測定，以對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)(X)，峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，得回歸方程Y＝826913X，R2＝0.9999。結(jié)果表明檸檬烯在0.001~4.806mgml-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖3。圖3檸檬烯標(biāo)準(zhǔn)曲線4.3精密度試驗(yàn)精密吸取對(duì)照品溶液1μl，按“3.2”色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣5次，測定檸檬烯峰面積的RSD為0.2%（n=5），見表7。結(jié)果表明儀器精密度良好。表7精密度試驗(yàn)結(jié)果編號(hào)品種名稱峰面積RSD%2制枳實(shí)1334660.21331941339281339231337494.4重復(fù)性試驗(yàn)取編號(hào)為“2”的藥材，按“4.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液6份，各精密吸取1μl，按“3.2”色譜條件，測得檸檬烯平均含量為0.05gg-1，RSD=1.7%（n=6），見表8。結(jié)果表明方法重復(fù)性良好。表8重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果（gg-1，n=6）編號(hào)品種名稱含量/%平均含量/%RSD%2制枳實(shí)0.0530.051.70.0530.0510.0510.0510.0514.5穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取編號(hào)為“2”的藥材供試品溶液1μl，按“3.2”色譜條件，分別于0，12，24，36，48h進(jìn)樣，分別測定檸檬烯峰面積，結(jié)果檸檬烯峰面積的RSD=0.8%（n=5），見表9。結(jié)果表明供試品溶液在48h內(nèi)穩(wěn)定性良好。4.6回收率試驗(yàn)取已知含量的枳實(shí)藥材飲片（2-制枳實(shí)，其中檸檬烯含量為0.05gg-1）適量，粉碎過四號(hào)篩，取約1.0g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，再分別精密加入25ml預(yù)先配制好的每毫升含檸檬烯對(duì)照品0.02mg的乙酸乙酯溶液，平行操作6份，按“4.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“3.2”色譜條件方法測定檸檬烯含量，結(jié)果平均回收率為105.77%，RSD為3.7%（n=6）。結(jié)果表明方法準(zhǔn)確性良好。表9穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果編號(hào)名稱峰面積RSD%2制枳實(shí)390640.839102391003936439778表10回收率試驗(yàn)結(jié)果待測成分樣品取樣量(g)供試品中含量(mg)加入量(mg)測得總量(mg)回收率%平均回收率%RSD%檸檬烯1.01010.48800.50931.043108.95105.793.41.01430.49001.002100.471.01670.49111.028105.491.01260.48921.043108.701.01330.48951.012102.631.01300.48941.042108.504.7樣品含量測定分別精密稱定11批枳實(shí)樣品約2.0g，每批次平行做2份，按“4.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“3.2”色譜條件測定檸檬烯峰面積，采用外標(biāo)法計(jì)算檸檬烯含量，結(jié)果見表11。表11樣品含量測定結(jié)果（gg-1，n=2）編號(hào)名稱炮制方法平均含量%備注1枳實(shí)凈制0.43/2制枳實(shí)發(fā)酵后蒸制0.061號(hào)自制品3麩炒枳實(shí)麩炒0.241號(hào)自制品4制枳實(shí)發(fā)酵后蒸制0.051號(hào)委托加工5麩炒枳實(shí)麩炒0.161號(hào)委托加工6麩炒枳實(shí)麩炒0.01/7枳實(shí)凈制切制2.09/8枳實(shí)凈制切制0.02/9枳實(shí)凈制切制0.02/10麩炒枳實(shí)麩炒0.49/11麩炒枳實(shí)麩炒2.04/5結(jié)果與討論本實(shí)驗(yàn)通過氣相色譜法對(duì)生枳實(shí)及其麩炒品、蒸制品和市場收集的合格枳實(shí)藥材等的十一批次的藥材飲片的揮發(fā)性成分檸檬烯進(jìn)行含量測定。結(jié)果顯示，標(biāo)準(zhǔn)飲片中生品枳實(shí)檸檬烯含量為0.43%，自制麩炒枳實(shí)和制枳實(shí)含量分別為0.24%和0.06%，委托加工的麩炒枳實(shí)和制枳實(shí)分別為0.16%和0.05%；均較生品枳實(shí)有大幅度降低。而從流通領(lǐng)域收集到的3批生枳實(shí)飲片，含量分別為2.09%、0.02%、0.02%，不同地方購入的生枳實(shí)中揮發(fā)性成分檸檬烯的含量有很大不同，其原因可能有：（1）產(chǎn)地不同，生長的土壤、環(huán)境、氣候不同對(duì)枳實(shí)的品質(zhì)產(chǎn)生影響；（2）采集時(shí)間不同對(duì)枳實(shí)的品質(zhì)產(chǎn)生影響；（3）飲片儲(chǔ)存時(shí)間過長造成揮發(fā)油逸失；（4）為農(nóng)戶收集落果加工成的枳實(shí)飲片。3批麩炒枳實(shí)飲片，含量分別為0.01%、0.49%、2.04%。其中兩批生枳實(shí)的檸檬烯含量均為0.02%，疑似樣品儲(chǔ)存時(shí)間過長，或是為農(nóng)戶收集落果加工成的枳實(shí)飲片。3批麩炒枳實(shí)飲片，其中1批的檸檬烯含量達(dá)2.04%，該批樣品疑為未經(jīng)充分炒制的麩炒枳實(shí)飲片。根據(jù)含量測定結(jié)果枳實(shí)主要揮發(fā)性成分檸檬烯在不同炮制品中的含量與枳實(shí)生品相比均有不同程度的降低，通過炮制能夠有效緩和枳實(shí)的藥性，在實(shí)際應(yīng)用中可根據(jù)具體情況選擇枳實(shí)藥材飲片進(jìn)行調(diào)劑，保證臨床治療效果。給臨床應(yīng)用中枳實(shí)藥材飲片的調(diào)劑提供選擇。實(shí)驗(yàn)證實(shí)枳實(shí)藥材的貯存時(shí)間、是否炮制以及炮制時(shí)間、火候等因素均對(duì)揮發(fā)性物質(zhì)造成不同程度的損失，炮制后主要揮發(fā)性成分檸檬烯含量呈規(guī)律性的降低趨勢(shì)，因此能夠根據(jù)揮發(fā)性成分檸檬烯含量的降低程度初步評(píng)價(jià)枳實(shí)藥材的炮制飲片的炮制程度。由于樣品前處理考察項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)順序設(shè)計(jì)不當(dāng)，先考察了提取溶劑和提取溶劑量再考察提取方法，而論文實(shí)驗(yàn)開展時(shí)間有限，在提取方法考察確定為回流提取法直接采用先前考察確定的溶劑乙酸乙酯、溶劑量25ml，并未再次進(jìn)行考察，使得實(shí)驗(yàn)邏輯不夠嚴(yán)謹(jǐn)。我應(yīng)正視存在的不足，未來的相關(guān)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)避免這類錯(cuò)誤的發(fā)生。

結(jié)論本實(shí)驗(yàn)以枳實(shí)主要揮發(fā)性成分檸檬烯為測定指標(biāo)，建立準(zhǔn)確、靈敏、簡便的含量測定方法，可為今后枳實(shí)及其炮制品種的質(zhì)量控制和炮制程度的初步評(píng)價(jià)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，同時(shí)對(duì)傳統(tǒng)中藥枳實(shí)的開發(fā)和利用具有一定意義。

參考文獻(xiàn)：[1]國家藥典委員會(huì).中國藥典(一部)[S].中國醫(yī)藥科技出版社.2015:247.[2]許姍姍,許浚,張笑敏,等.常用中藥陳皮、枳實(shí)和枳殼的研究進(jìn)展及質(zhì)量標(biāo)志物的預(yù)測分析[J].中草藥,2018,49(01):35-44.[3]張瑞,王和平,花似虎.枳實(shí)、枳殼麩炒原理的實(shí)驗(yàn)研究[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),1981,(01):53-54.[4]陳輝.神農(nóng)本草經(jīng)[M].第三版.北京:學(xué)苑出版社,2007:186.[5]王孝濤.歷代中藥炮制法匯典[M].第一版.南昌:江西科學(xué)技術(shù)出版社,1998:238.[6]鐘贛生.中藥學(xué)[M].第九版.北京:中國中醫(yī)藥出版社,2012:252.[7]廣東省衛(wèi)生廳.廣東省中藥炮制規(guī)范[M].一九八四年版.廣州:廣東省衛(wèi)生廳.1984:142.[8]黃雪麗,陳玉宇.中藥枳實(shí)的化學(xué)成分及分析方法研究進(jìn)展[J].廣州化工,2016,44(17):22-25+49.[9]何洋,肖偉娟,曹演威,等.高效液相色譜法同時(shí)測定枳實(shí)中3種黃酮類成分的含量[J].今日藥學(xué),2009,19(06):46-48.[10]王其田,楊西曉,郭丹.小承氣湯的高效液相色譜指紋圖譜研究[J].中國藥業(yè),2007,(20):28-29.[11]MoulehiI,BourgouS,OurghemmiI,etal.Varietyandripeningimpactonphenoliccompositionandantioxidantactivityofmandarin(CitrusreticulateBlanco)andbitterorange(CitrusaurantiumL.)seedsextracts[J].IndustrialCrops&Products,2012,39(1):74-80.[12]KimHG,KimGS,ParkS,etal.FlavonoidprofilinginthreecitrusvarietiesnativetotheRepublicofKoreausingliquidchromatographycoupledwithtandemmassspectrometry:contributiontooverallantioxidantactivity[J].BiomedicalChromatography,2012,26(4):464-470.[13]JeonSM,BokSH,JangMK,etal.Antioxidativeactivityofnaringinandlovastatininhighcholesterol-fedrabbits[J].LifeSciences,2001,69(24):2855-2866.[14]EJChoi.Antioxidativeeffectsofhesperetinagainst7,12-dimethylbenz(a)anthracene-inducedoxidativestressinmice[J].

LifeSci,2008,82(21-22):1059-1064.[15]鄭學(xué)欽,沈小萍,劉紫英.陳皮、青皮、枳實(shí)和枳殼的氣相色譜研究[J].海峽藥學(xué),1995,(04):4-5.[16]施學(xué)驕.酸橙果實(shí)不同采收期化學(xué)成分動(dòng)態(tài)變化及枳實(shí)、枳殼藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)研究[D].四川:成都中醫(yī)藥大學(xué),2012.[17]張紅,孫明江,王凌.枳實(shí)的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].中藥材,2009,32(11):1787-1790.[18]彭維.枳實(shí)和枳殼中保健有效成分的含量分析[J].廣西輕工業(yè),1996,(04):30-36.[19]曾憲儀,