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文檔簡介

1、實 驗 二 細菌形態(tài)和結構觀察（） （細菌的簡單染色和革蘭氏染色）,一、實驗目的 1、觀察細菌菌落征。 2、掌握細菌簡單染色、革蘭氏染色技術。 3、在油鏡下觀察細菌個體形態(tài)。,二、實驗原理,1、細菌菌落特征 2、細菌基本形態(tài) 3、細菌革蘭氏染色機理,共有特征：濕潤，較光滑，較透明，較粘稠，易挑取，質地均勻，顏色多樣，菌落正反面及邊緣與中央顏色一致。 特有特征： 有鞭毛：菌落大而平坦，邊緣多缺刻、不規(guī)則 有糖被：菌落大，透明，呈蛋清狀 有芽孢：菌落外觀粗糙，“干燥”，不透明且表面多褶,基本形態(tài)：球狀，桿狀，螺旋狀。 其它形態(tài)： 星形，方形，帶柄狀，畸形，衰退形,G：細胞壁厚，內肽聚糖含量高，且交

2、聯(lián)度大，網孔小，不含脂類。 G ：細胞壁薄，內肽聚糖含量低，交聯(lián)度小，網孔大，脂類含量高。,革蘭氏染色過程：初染媒染脫色復染。,三、實驗材料,1、菌種：大腸桿菌（Escherichia coli）、枯草芽孢桿菌（B.subtilis）、金黃色葡萄球菌（S.aureus）（培養(yǎng)1824 h的菌落平板各一個）。 2、染液 （1）簡單染色：呂氏美藍染液或齊氏石炭酸復紅染液。 （2）革蘭氏染液：草酸銨結晶紫染液、革蘭氏碘液、95%乙醇、番紅染液。 3、其他物品：普通光學顯微鏡、載玻片、接種環(huán)、鑷子、酒精燈、無菌水、吸水紙、香柏油、香柏油、二甲苯、擦鏡紙。,四、實驗步驟,1、菌落形態(tài)觀察： 2、細菌簡單

3、染色： 3、細菌革蘭氏染色。,注意：菌落顏色、濕度、形狀、大小、透明度、顏色、邊緣是否規(guī)則等特征。,染色過程： 涂片干燥固定染色（1min）水洗干燥鏡檢 注意事項： 涂片：取菌量不能太大 干燥：自然干燥 水洗：水流不能直接沖在涂菌處,細菌革蘭氏染色過程,涂片干燥固定初染（草酸銨結晶紫染色1min）水洗媒染（碘液沖洗后覆蓋1min）水洗脫色（95乙醇脫色至流下乙醇無色為止）立即用水沖洗復染（番紅染色23min）水洗干燥鏡檢,染色結果,金黃色葡萄球菌革蘭氏染色結果,染色結果,大腸桿菌革蘭氏染色結果,染色結果,金黃色葡萄球菌和大腸桿菌混合菌樣的革蘭氏染色結果,染色結果,枯草芽孢桿菌革蘭氏染色結果,實 驗 要 求,每個同學必須做枯草芽孢桿菌簡單染色涂片。 每組同學必須做金黃色葡萄球菌或大腸桿菌革蘭氏染色涂片。 每組同學必須做枯草芽孢桿菌革蘭氏染色涂片。,五、實驗報告,1、記錄三種菌的革蘭氏染色結果，繪出菌體細胞形態(tài)。 2、要得到

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