1、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),基本操作技術(shù) 溶液的配制 緩沖溶液,天津醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部 生物化學(xué)教研室 呂學(xué)儒,2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,基 本 操 作 技 術(shù),溶液的配制,緩沖溶液,P39,P40,P8,2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,實(shí)驗(yàn)一 基本操作技術(shù),實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握玻璃儀器的清洗； 學(xué)會(huì)正確使用吸量管、微量移液器、酒精計(jì)、粗天平的使用。 玻璃儀器 燒杯、試管、量杯、量筒、刻度吸量管、滴管等。,2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,實(shí)驗(yàn)一 基本操作技術(shù),一、玻璃儀器的洗滌與清潔 （一）新購(gòu)玻璃儀器的清洗,清水沖,沾洗衣粉刷,清水沖,蒸餾水洗,（二）使用

2、過的玻璃儀器清洗,1.一般玻璃儀器,清水沖,沾洗衣粉刷,清水沖,蒸餾水洗,2.容量?jī)x器,清水沖,鉻酸洗液浸泡,清水沖,蒸餾水洗,3.比色杯,清水沖,鹽酸洗液浸泡,清水沖,蒸餾水洗,2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,二、刻度吸量管的使用 量取10ml以下的任意體積時(shí)用。 刻度標(biāo)記有兩種： 上為零刻度，下為總量刻度； 上為總量刻度，下為零刻度的。 放液后，將吸量管尖在容器內(nèi)壁上垂直停留15秒即可。,實(shí)驗(yàn)一 基本操作技術(shù),2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,近年來為了便于準(zhǔn)確快速地選取吸量管，國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織統(tǒng)一規(guī)定：在刻度吸量管的上方印上各種彩色環(huán)，以利辨別，其容積標(biāo)志如下表：,實(shí)

3、驗(yàn)一 基本操作技術(shù),2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,實(shí)驗(yàn)一 基本操作技術(shù),吸量管的使用,選擇,執(zhí)管,取液,調(diào)準(zhǔn)刻度,放液,洗滌,2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,三、微量移液器的使用 1.調(diào)體積選取鈕至所需數(shù)值。 2.套上吸嘴，旋緊。 3.垂直持握微量移液器外殼，按下大拇指至取液按鈕。 4.將微量移液器吸嘴插入溶液，徐徐松開大拇指，使其復(fù)原。 5.排放時(shí)，重新將大拇指按下，比取液時(shí)高一檔以排空。 注：移液過程中應(yīng)控制速度，力度。如需移取另一樣品，按吸嘴排放鈕，更換吸嘴。,實(shí)驗(yàn)一 基本操作技術(shù),2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,四、酒精表的使用 選擇酒精表的測(cè)試范

4、圍在70%80% v/v。 在沒有其他量器的條件下，將酒精以適量蒸餾水稀釋，用酒精表檢測(cè)濃度，當(dāng)刻度指向75時(shí)即為消毒酒精。,實(shí)驗(yàn)一 基本操作技術(shù),2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,五、托盤天平的使用 1調(diào)零點(diǎn) 2. 稱量 稱量時(shí)，左放物，右放碼。,實(shí)驗(yàn)一 基本操作技術(shù),2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,3.稱量完畢 砝碼放回砝碼盒中，游碼移至刻度“0”處，天平的兩個(gè)托盤重疊后，放在天平的一側(cè)，使天平休止，以保護(hù)天平的刀口。,實(shí)驗(yàn)一 基本操作技術(shù),2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?熟悉三種濃度溶液配制；學(xué)習(xí)配制常用醫(yī)用溶液 一、儀器與試劑 （一）儀器 托

5、盤天平、量筒（100ml、）、100ml燒杯、刻度吸管（10ml、5ml）、容量瓶（50ml）酒精計(jì)、玻璃棒、藥匙、毛刷。 （二）試劑 95%乙醇、NaCl固體、新潔爾滅、TD。,實(shí)驗(yàn)二 溶液的配制,2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,實(shí)驗(yàn)二 溶液的配制,1.75%酒精的配制： 用95%（ml/ml)酒精配制75%的酒精50mL。 用酒精表測(cè)75%的酒精度 2.配制0.1%新潔爾滅溶液50ml 3.配制生理鹽水50ml。 4.制備1%TD消毒液10ml。,溶液的配制與稀釋,2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,1.緩沖原理： NaH2PO4Na2HPO4 H2PO42- 是抗堿成

6、分 HPO42- 是抗酸成分 在溶液加少量的堿時(shí)， OH-與H2PO42- 電離產(chǎn)生的H+生成H2O，使溶液的PH值不發(fā)生明顯變化。 在溶液加少量的酸時(shí)， H+與HPO42- 結(jié)合生成H2PO42- ，溶液的PH值也不發(fā)生明顯變化。 所以，緩沖溶液具有抗酸、抗堿的作用。,實(shí)驗(yàn)三 緩沖溶液,2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,實(shí)驗(yàn)三 緩沖溶液,2.配制緩沖溶液 用刻度吸管取濃度為0.2M Na2HPO4 5.0毫升，濃度為0.2M NaH2PO4 10.0毫升，混勻后用pH試紙測(cè)定其pH值。 用刻度吸管取濃度為0.2M Na2HPO4 10.0毫升，濃度為0.2M NaH2PO4 5.0

7、毫升，混勻后用pH試紙測(cè)定其pH值。 問題：兩種比例不同的緩沖溶液pH值為何不同？,2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,3.緩沖溶液的抗酸、抗堿作用 將制好的兩種緩沖溶液各分成兩份，分別加入少量鹽酸及少量氫氧化鈉溶液，用pH試紙測(cè)定其pH值。 多加一些鹽酸及氫氧化鈉溶液后又有何變化，用pH試紙測(cè)定其pH值。,實(shí)驗(yàn)三 緩沖溶液,2020年7月25日星期六6時(shí)19分27秒,知識(shí)拓展,酒精又叫乙醇，是最常用的皮膚消毒劑，75的酒精用于滅菌消毒；50的酒精用于防褥瘡；2050的酒精擦浴用于高熱病人的物理降溫。不同濃度的酒精都是由高濃度(95)酒精用蒸餾水稀釋而成的。 酒精之所以能消毒是因?yàn)榫凭軌蛭占?xì)菌蛋白的水分，使其脫水變性凝固，從而達(dá)到殺滅細(xì)菌的目的。如果使用高濃度酒精，對(duì)細(xì)菌蛋白脫水過于迅速，使細(xì)菌表面蛋白質(zhì)首先變性凝固，形成了一層堅(jiān)固的包膜，酒精反而不能很好地滲入細(xì)菌內(nèi)部，以致影響其殺菌能力。75的酒精與細(xì)菌的滲透壓相近，可以在細(xì)菌表面蛋白未變性前逐漸不斷地向菌體內(nèi)部滲入，使細(xì)菌所有蛋白脫水、變性凝固，最終殺死細(xì)菌，酒精濃度低于7