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1、 皂角刺中黃酮提取及其抗氧化性研究2022/9/25 皂角刺中黃酮提取及其抗氧化性研究2022/9/24 二、皂角刺概述 一、引言 三、實(shí)驗(yàn)中所用到的儀器 四、皂角刺中黃酮的測定 六、結(jié)論 五、皂角刺中黃酮的抗氧化性研究目錄 七、致謝2022/9/25 二、皂角刺概述 一、引言 三、實(shí)驗(yàn)中所一、引言皂角刺中是一種傳統(tǒng)的中藥,在臨床上有著大量的應(yīng)用。它含有大量的黃酮,黃酮是一種很強(qiáng)的抗氧化劑,可有效清除體內(nèi)的氧自由基,這種阻止氧化的能力是維生素E的十倍以上,這種抗氧化作用可以阻止細(xì)胞的退化、衰老,也可阻止癌癥的發(fā)生。因此本文將對皂角刺中黃酮的含量進(jìn)行了測定,并對其氧化性進(jìn)行研究,以期對皂角刺藥理
2、作用的開發(fā)提供提供有用的資料。2022/9/25一、引言皂角刺中是一種傳統(tǒng)的中藥,在臨床上有著大量的應(yīng)用。它二、皂角刺概述皂角刺(Chinese honeylocust spine ),又稱皂角針,為豆科落葉喬木植物皂莢樹的棘刺。分布較廣。2022/9/25二、皂角刺概述皂角刺2022/9/24皂角刺概述 皂角刺化學(xué)成分皂莢皂甙黃酮氨基酸棕櫚酸硬酯酸油酸酚類多元醇2022/9/25皂角刺概述 皂角刺化學(xué)成分皂莢皂甙黃酮氨基酸棕櫚酸硬酯酸油酸抗菌、抗炎作用31542藥理作用6降血脂等治療乳腺增生等疾病抗腫瘤作用免疫調(diào)節(jié)與抗過敏作用皂角刺藥理作用抗凝血作用抗菌、抗炎作用31542藥理作用6降血脂等
3、治療乳腺增生等疾病三、主要儀器電子天平HCR-3018高速離心機(jī)恒溫水浴鍋2022/9/25三、主要儀器電HCR-3018高速離心機(jī)恒溫水浴鍋2022/三、主要儀器超波清洗器循環(huán)水真空泵DJZ型粉碎機(jī)2022/9/25三、主要儀器超波清洗器循環(huán)水真空泵DJZ型粉碎機(jī)2022/9四、皂角刺中黃酮測定蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制2022/9/25四、皂角刺中黃酮測定蘆2022/9/24皂角刺中黃酮測定實(shí)驗(yàn)流程稱取2.00g皂角刺(加入20mL60%乙醇)超聲30min抽濾定容過夜離心取上清液加入藥品定容 測定移取1ml40皂角刺中黃酮測定實(shí)驗(yàn)流程稱取2.00g皂角刺(加入20mL6皂角刺中黃酮測定數(shù)據(jù)2022
4、/9/25皂角刺中黃酮測定數(shù)據(jù)2022/9/24五、皂角刺中黃酮抗氧化性研究1、脂質(zhì)體系中抗氧化能力測定2、Fe3+還原能力測定3、OH清除能力測定4、DPPH清除能力2022/9/25五、皂角刺中黃酮抗氧化性研究1、脂質(zhì)體系中抗氧化能力測定201、脂質(zhì)體系中抗氧化能力測定(抑制率)實(shí)驗(yàn)步驟1mL LLS+ 1mLFeCl3+1mLVc+1mL樣品混勻避光 37水浴 1h加入TCA-TBA-HCl混合液避光 沸水煮 15min迅速冷卻離心取上清液在532nm處測定吸光度As以1mL蒸餾水為空白測定吸光度Ac2022/9/251、脂質(zhì)體系中抗氧化能力測定(抑制率)實(shí)1mL LLS+ 11、脂質(zhì)體
5、系中抗氧化能力測定(抑制率)測定數(shù)據(jù)以及抑制率 抑制率%=(Ac-As/As)1002022/9/251、脂質(zhì)體系中抗氧化能力測定(抑制率)測定數(shù)據(jù)以及抑制率 1、脂質(zhì)體系中抗氧化能力測定(抑制率)以黃酮濃度/(ug/mL)為橫軸,抑制率為縱軸作的曲線如下圖隨著黃酮濃度的增加脂質(zhì)體系中抗氧化能力(抑制率)也增加。2022/9/251、脂質(zhì)體系中抗氧化能力測定(抑制率)以黃酮濃度/(ug/m2、Fe3+還原能力測定實(shí)驗(yàn)步驟1mL樣品+2.0mL PBS緩沖液 + 2.0mL鐵氰化鉀搖勻50水浴20min迅速冷卻加入2mLTCA混勻3000r/min離心10min取2mL上清液+0.4mLFeCl
6、3+2.0mL蒸餾水以蒸餾水調(diào)零 以Vc代替樣品作為陽性對照 在700nm測定吸光度2022/9/252、Fe3+還原能力測定實(shí)1mL樣品+2.0mL PBS緩沖2、Fe3+還原能力測定Fe3+還原能力測定表格.doc以黃酮濃度/(ug/mL)為橫軸,樣品吸光度為縱軸作的曲線如下圖隨著皂角刺黃酮濃度的升高樣品吸光度逐漸增大,即Fe3+還原能力隨著黃酮濃度的增加越來越強(qiáng) 2022/9/252、Fe3+還原能力測定Fe3+還原能力測定表格.doc以黃3、OH清除能力測定實(shí)驗(yàn)步驟硫酸亞鐵銨、水楊酸-乙醇溶液和樣品各1mL+0.03mLH202搖勻37水浴30min510nm測定吸光度Ax以蒸餾水代替
7、樣品作空白對照測吸光度A0 以Vc作為陽性對照樣品本底吸光度用蒸餾水代替雙氧水測定吸光度Ax0 每個濃度平行測定3次2022/9/253、OH清除能力測定實(shí)硫酸亞鐵銨、水楊酸-乙醇溶液搖勻373、OH清除能力測定OH清除能力測定表格.doc以黃酮濃度/(ug/mL)為橫軸,清除率%為縱軸作的曲線如下圖隨著黃酮濃度的增加,皂角刺的OH清除能力越來越弱。2022/9/253、OH清除能力測定OH清除能力測定表格.doc以黃酮濃4、DPPH清除能力DPPH清除能力數(shù)據(jù)及計(jì)算DPPH清除率=(1-(Ai-Aj/Ae)1002022/9/254、DPPH清除能力DPPHDPPH清除率=(1-(Ai-DP
8、PH清除能力以黃酮濃度/(ug/mL)為橫軸,DPPH清除率%為縱軸作的曲線如下圖隨著黃酮濃度的增加,皂角刺的DPPH的清除率越來越強(qiáng)。 2022/9/25DPPH清除能力以黃酮濃度/(ug/mL)為橫軸,DPPH六、結(jié)論根據(jù)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線A=0.0379C+0.0003稀釋倍數(shù)為25,黃酮含量為3.48mg/mL;算出皂角刺黃酮提取率為8.70%。1、皂角刺中黃酮的提取2022/9/25六、結(jié)論根據(jù)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線A=0.0379C+0.00031、六、結(jié)論1)隨著黃酮濃度的增加脂質(zhì)體系中抗氧化能力(抑制率)也增加2)隨著皂角刺黃酮濃度的升高樣品吸光度逐漸增大,即Fe3+還原能力隨著黃酮濃度的增加越來越強(qiáng);3)隨著黃酮濃度的增加,皂角刺的OH清除能力越來越弱4)隨
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