農(nóng)藥在蜂膠薄層上的快速定性方法

在薄梯度下，可以快速分離微藻，并直接在薄板上測定分離物質(zhì)。因此,目前該法已成為應(yīng)用最廣泛的分離分析方法之一。但是薄層色譜的定性鑒定至今仍采用RF值或RM值,而由于許多物質(zhì)在一些溶劑系統(tǒng)中的RF值往往是相同的,有時甚至經(jīng)多種溶劑系統(tǒng)展開后其RF值仍無很大差異,這就給在薄層上對物質(zhì)的定性鑒定造成了困難。作者應(yīng)用島津雙波長薄層色譜掃描儀對農(nóng)藥在硅膠薄層上的定性方法進行了研究。目前國際上對微量物質(zhì),尤其是環(huán)境化學分析的樣品中多種微量農(nóng)藥及其它有害有機物質(zhì)的定性鑒定,雖有傅里葉紅外光譜,氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀等先進設(shè)備可以應(yīng)用,但這些儀器昂貴、且操作也繁復(fù)。相比之下薄層色譜掃描儀較為價廉易得,操作也較簡便,有其獨特的優(yōu)點。近年來,國外使用薄層色譜掃描儀進行定量測定的文獻甚多,但在定性方面則報導(dǎo)較少。作者在本文中首次提出了22種農(nóng)藥在硅膠薄層上的吸收光譜圖,并在此基礎(chǔ)上探索出用斑點原位掃描吸收光譜與RF值相結(jié)合的新定性鑒定方法。本法具有快速、鑒定準確、樣品量少(10-6～10-8克)和不破壞樣品等優(yōu)點。實驗部分(一)色譜分析板roe1.農(nóng)藥樣品:供測試用的22種農(nóng)藥均為標準品。農(nóng)藥名稱及純度見表1。上述農(nóng)藥分別用丙酮或無水乙醇配制成1毫克/毫升的標準溶液。2.薄層色譜板:硅膠G(青島海洋化工廠)。硅膠G(E.Merck)。硅膠HF254(E.Merck)。硅膠HF254+366(E.Merck)。HPTLC硅膠F254板(E.Merck)。除HPTLC板外,其余四種吸附劑用Stahl涂布器涂板,薄層厚度為0.25毫米,活度為Ⅱ—Ⅲ級(按Stahl氏定級標準)。3.儀器:具有ChromatopacEIA微處理機裝置的日本島津雙波長薄層色譜掃描CS-900。(二)薄層譜觀察和各農(nóng)藥的rf值將22種農(nóng)藥的標準溶液用微量注射器分別點于硅膠HF254薄層上,經(jīng)溶劑系統(tǒng)展開10厘米后取出,揮盡溶劑,在紫外燈(254毫微米)下觀察薄層譜,記下各農(nóng)藥的RF值。然后將薄層板放入薄層色譜掃描儀中,分別對各農(nóng)藥在紫外光區(qū)進行單波長反射方式的原位掃描,同時記錄下各個波長中的吸收峰,記錄器靈敏度為×1,紙速為5毫米/分。原位掃描吸收光譜法rf1.我們共作了22種農(nóng)藥在硅膠HF254薄層上的原位掃描吸收光譜圖(圖1一6),為使用薄層色譜掃描儀對農(nóng)藥作定性鑒定提供了標準圖譜,也為在硅膠薄層上對農(nóng)藥及其殘留量作定量測定時提供了波長數(shù)據(jù)。同時從表2可以看出,農(nóng)藥在硅膠薄層上及在溶劑中的吸收光譜大多是有差異的,這是由于不同介質(zhì)而引起的變化。因此用薄層色譜掃描儀在薄層上對農(nóng)藥作定性及定量測定時不能把文獻中記載的在溶劑中的吸收光譜數(shù)據(jù)(λmax)直接引用。2.在表3中,從各種農(nóng)藥在硅膠薄層上的RF值及其原位掃描的最大吸收峰中可以看出,許多農(nóng)藥如敵草隆、亞胺硫磷和殺蟲畏,(RF=0.30),甲基對硫磷、莠去津,殺螟松和利谷隆(RF=0.42—0.43),對硫磷和倍硫磷(RF=0.52),伏殺磷和甲氧氯(RF=0.55),三硫磷和除草醚(RF=0.65)等的RF值是相同的。因此,當樣品中含有這些農(nóng)藥時,單用RF值就很難于定性。但是由于它們的吸收光譜都不相同,所以就能很方便地從樣品中鑒定出這些農(nóng)藥。相反,某些農(nóng)藥如甲基托布津和托布津,甲基對硫磷和對硫磷等的吸收光譜雖然相同,但其RF值卻不相同,也很容易區(qū)別。這種在同一薄層板上將物質(zhì)的原位掃描吸收光譜與其RF值相結(jié)合的鑒定法,經(jīng)作者二年多的實際應(yīng)用,都得到滿意效果。3.從圖7—9中對硫磷、西維因和伏草隆分別在國產(chǎn)硅膠G及西德E.Merck廠的硅膠G、HF254、HF254+366和HPTLCF254等薄層上的吸收光譜圖來看,硅膠的類別對農(nóng)藥的吸收光譜并無影響,但對吸收強度則產(chǎn)生差異,強度大小的規(guī)律為硅膠HF254>硅膠G>硅膠HF254+366。這是因為當用短波長紫外光掃描時,硅膠HF254薄層上的熒光強度要比硅膠HF254+366大得多,因此其熒光減退量也大,檢出靈敏度就高。這個現(xiàn)象對許多不產(chǎn)生熒光,但對紫外光有吸收的農(nóng)藥及其它化合物采用熒光減退法來進行掃描定量測定有重要的參考價值。此外,我們在實驗中發(fā)現(xiàn)(圖10)對硫磷在硅膠HF254薄層上分別用氯仿:丙酮(8+2)、正己烷:丙酮(7+3)、正己烷:乙酸乙酯(7+3)三種溶劑系統(tǒng)展開后的原位掃描吸收光譜表明,溶劑系統(tǒng)的變化對農(nóng)藥的吸收光譜也無影響。4.對硫磷在結(jié)構(gòu)上都具有同一發(fā)色基團4-硝基苯,所以吸收光譜相同,吸收強度也基本上一致。甲基對硫磷和殺螟松在結(jié)構(gòu)上雖也近似,但由